论文摘要
EZH2(enhance of zeste homolog 2)是PCG(polycomb group)基因家簇的一员,与果蝇zeste基因增强子(E(z))是同源基因,PCG基因是一进化高度保守基因,在胚胎发育过程中,通过对染色体的修饰作用而维持同源异形基因(homeotic gene)沉默状态。除了维持胚胎正常发育作用之外,EZH2在衰老细胞中低表达,P53下调EZH2的表达而发挥其细胞复制性衰老的作用。Varambally等通过基因表达差异发现转移前列腺癌与局限性前列腺癌比较,有55个基因表达明显上调,EZH2上调最为明显;转移前列腺癌EZH2表达高于良性前列腺肿瘤、局限性前列腺癌,而且前列腺癌高EZH2表达预后较差。通过原位杂交技术,发现EZH2在多种肿瘤中基因扩增。因此,本研究欲探讨EZH2在肝细胞癌中的表达及其对肝癌细胞株HepG2增殖及细胞周期的影响。 第一部分 EZH2在肝细胞癌中的表达及与临床病理特征的关系 (一) 材料与方法 分析28例肝细胞癌及其癌旁组织(浙江大学附属第一医院外科2004-2005年期间肝细胞癌切除术的患者)在转录水平及翻译水平的表达。(1)RT-PCR:lmlTrizol加入100mg组织提取总RNA,取lug总RNA逆转成cDNA,以此为模板进行PCR扩增。EZH2上游引物:5’-GACGGCTTCCCAATAACAG-3’;下游引物:5’-ATTGAGGCTTCAGCACCAC-3’;β-actin 上游引物:5’-ACTTAGTTGCGTTACACCCTTTC-3’;下游引物:5’-CTGTCACCTTCACCGTTCC-3’。EZH2
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