论文摘要
丹参作为我国传统的中药材之一，具有“祛瘀止痛，活血通经，清心除烦”的功效。其中丹参水溶性酚酸类成分在丹参的作用中占重要地位，具有很强的清除自由基和抗氧化作用，并表现出以较强抗氧化作用为特点的多方面药理作用，临床上广泛用于治疗心血管疾病。本研究在高效液相色谱指纹图谱指导下，利用液相色谱等现代植物化学分离技术筛选出合适的提取分离方案对丹酚酸类化合物进行工业化提取分离，并对分离得到的化合物采用五种体外抗氧化体系研究其抗氧化活性及其量效关系。实验采用萃取与正相硅胶、反相树脂CG161、Sephadex LH-20等多种工业色谱相结合的方法确定出了提取分离丹酚酸类化合物的分离方案，并分离得到三个化合物，经红外光谱、质谱、核磁共振等波谱技术分析鉴定，确定三个化合物分别是迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A。实验采用Fenton、邻苯三酚自氧化、DPPH、还原、卵黄脂蛋白过氧化等五种体系利用比色法研究了三种化合物的抗氧化活性，并考查了浓度与抗氧化活性之间的剂量关系。结果表明三种化合物有很强的·OH、O2-·、DPPH·清除作用、还原能力和抗脂质过氧化作用，五种抗氧化活性随浓度的增加而增强，且呈现良好的量效关系。除邻苯三酚自氧化体系外，在其它四种体系中，三种化合物的抗氧化能力都强于对照芦丁和Vc，供试的三种丹酚酸类化合物中丹酚酸A的抗氧化能力最强，迷迭香酸次之，然后是丹酚酸B。丹酚酸B、迷迭香酸、丹酚酸A清除·OH的量效关系及IC50分别为y丹酚酸B=225.33x-24.721，r2=0.9919，IC50=0.3371g/L；y迷迭香酸=496.37x-36.545，r2=0.9813，IC50=0.1742g/L；y丹酚酸A=583.5x-29.411，r2=0.9944，IC50=0.1363g/L；清除O2-·的量效关系及IC50分别为y丹酚酸B=12.034x+0.3919，r2=0.9708，IC50=4.1223g/L；y迷迭香酸=12.403x+1.6514，r2=0.9869，IC50=3.8984g/L；y丹酚酸A=11.865x+10.432，r2=0.9878，IC50=3.3342g/L；清除DPPH·的量效关系及IC50分别为y丹酚酸B=3513.8x+1.567，r2=0.9990，IC50=0.0138g/L；y迷迭香酸=3699.6x+4.086，r2=0.9906，IC50=0.0124g/L；y丹酚酸A=4255x+3.18，r2=0.9995，IC50=0.0110g/L；抑制脂质过氧化的量效关系及IC50分别为y丹酚酸B=218.95x-6.672， r2=0.9833，IC50=0.2588g/L；y迷迭香酸=279.04x-7.358，r2=0.9873，IC50=0.2056g/L；y丹酚酸A=210.3x+27.128，r2=0.9856，IC50=0.1088g/L；与还原能力量效关系分别为：y丹酚酸B=7.41x+0.0699，r2=0.992；y迷迭香酸=10.355x+0.0746，r2=0.9997；y丹酚酸A=11.65x+0.0821，r2=0.9918。三种化合物的抗脂质过氧化作用、还原能力均与清除自由基能力具有正相关性。自由基清除能力越强，还原力越强，抗脂质过氧化能力越强。