膳食色氨酸对小鼠摄食的影响

论文摘要

为了研究膳食中不同色氨酸水平对摄食量的影响及可能机理。选用80只清洁级三周龄雄性昆明小鼠随机分为四组（Trp1.2组、Trp1.6组、Trp2.0组、Trp2.4组）,分别饲喂4种不同色氨酸水平的饲料（每千克饲料中分别含1.2g、1.6g、2.0 g、2.4 g色氨酸）,28 d后记录小鼠摄食量、体重、HPLC检测血浆中游离色氨酸含量、ELISA试剂盒检测下丘脑5-HT含量。24只清洁级三周龄雄性昆明小鼠随机分为3组（Control组、BCAA组、Trp组）,分别每天注射生理盐水、300 mg/kg·w剂量的BCAA（支链氨基酸）溶液、100 mg/kg·w剂量的Trp（色氨酸）溶液,7 d后,记录小鼠的摄食量,ELISA试剂盒检测小鼠下丘脑5-HT和GABA含量,相对定量PCR检测下丘脑和胃组织中Ghrelin、5-HT1AR、5-HT1BR、5-HT1DR、5-HT3R的基因表达。实验结果:（1）随着日粮中色氨酸水平增加,小鼠血浆中Trp水平、Trp/BCAA比值也增加,下丘脑中5-HT含量也随之提高,而小鼠摄食量降低。（2）小鼠腹腔注射BCAA溶液7 d后,小鼠下丘脑5-HT含量显著低于正常组,而GABA含量、Ghrelin基因相对表达量则高于正常组（P<0.05）;而小鼠腹腔注射色氨酸溶液7 d后,小鼠下丘脑5-HT含量显著高于正常组,而GABA含量、Ghrelin基因相对表达量则低于正常组（P<0.05）。且下丘脑中GABA含量、Ghrelin基因相对表达量与下丘脑5-HT含量显著负相关（P<0.05）。（3）小鼠腹腔注射色氨酸、BCAA溶液7 d后,下丘脑中GABA含量与下丘脑5-HT1BR、5-HT1DR基因的相对表达量极显著负相关（P<0.01）,与5-HT1AR基因的相对表达量显著负相关（P<0.05）,其中与5-HT1DR基因的相对表达量相关性最大;下丘脑Ghrelin基因的相对表达量5与-HT1AR、5-HT1BR、5-HT1DR基因的相对表达量极显著负相关（P<0.01）,而5-HT3R基因相对表达量无显著差异。胃组织Ghrelin基因的相对表达量与5-HT1AR基因的相对表达量极显著负相关（P<0.01）,与胃组织5-HT1BR基因的相对表达量显著负相关（P<0.05）,而5-HT1DR、5-HT3R基因相对表达量无显著差异。结果表明:（1）提高膳食中色氨酸水平,可增加小鼠血浆中游离Trp浓度和Trp/BCAA比值,提高小鼠下丘脑中5-HT的生物合成,进而抑制摄食。（2）通过补充和耗竭脑内的色氨酸,可以改变下丘脑5-HT含量,5-HT含量的变化影响下丘脑中GABA含量、Ghrelin基因表达量。说明,5-HT抑制摄食的路径中,有GABA和Ghrelin的参与。（3）5-HT抑制摄食的路径中下丘脑5-HT与下丘脑GABA、Ghrelin的相互作用,有5-HT1AR、5-HT1DR、5-HT1BR的参与。而胃组织5-HT与胃组织Ghrelin的相互作用,有5-HT1AR、5-HT1BR的参与。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 主要缩略词总汇
• 1 前言
• 1.1 色氨酸与5-HT 的生物合成
• 1.2 5-HT 及其受体与摄食
• 1.3 GABA、Ghrelin 与摄食调控
• 1.4 立题意义及研究内容
• 2 实验材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验动物与分组
• 2.1.2 氨基酸溶液和生理盐水的配制
• 2.1.3 血样及组织样品采集
• 2.1.4 药品和试剂
• 2.1.5 主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 摄食量和体重的测定
• 2.2.3 血浆中游离氨基酸的测定
• 2.2.4 下丘脑和胃组织5-HT 含量的测定
• 2.2.5 下丘脑中GABA 含量测定
• 2.2.6 小鼠下丘脑和胃组织中5-HT 受体基因及胃组织中Ghrelin 基因的相对表达量测定
• 2.2.7 数据处理与统计分析
• 3 结果与讨论
• 3.1 不同日粮色氨酸水平对小鼠摄食的影响
• 3.1.1 不同日粮色氨酸水平对小鼠摄食量、体增重及料重比的影响
• 3.1.2 不同日粮色氨酸水平对小鼠血浆Trp 含量、Trp/BCAA 的影响
• 3.1.3 不同日粮色氨酸水平对小鼠下丘脑中5-HT 含量的影响
• 3.1.4 小鼠饲料色氨酸水平、血浆中色氨酸浓度、血浆中 Trp/BCAA、下丘脑中5-HT 含量以及小鼠总摄食量之间的相关性分析
• 3.2 腹腔注射色氨酸、BCAA 溶液对小鼠摄食、下丘脑5-HT 与下丘脑GABA 和Ghrelin 的影响
• 3.2.1 腹腔注射色氨酸、BCAA 溶液对小鼠摄食量、体增重及料重比的影响
• 3.2.2 腹腔注射色氨酸、BCAA 溶液对小鼠下丘脑5-HT 含量
• 3.2.3 腹腔注射色氨酸、BCAA 溶液对小鼠下丘脑GABA 含量的影响
• 3.2.4 料重比、摄食总量、下丘脑5-HT 与GABA 含量之间的相关性分析
• 3.2.5 腹腔注射色氨酸、BCAA 溶液对小鼠下丘脑Ghrelin 基因表达的影响
• 3.2.6 料重比、摄食总量、下丘脑中5-HT 含量与Ghrelin 基因相对表达量之间的相关分析
• 3.3 腹腔注射色氨酸、BCAA 溶液对小鼠下丘脑相关5-HT 受体与 GABA 和Ghrelin 的影响
• 1AR,5-HT_1BR ，5-HT_1DR,5-HT₃R 基因表达的影响'>3.3.1 腹腔注射色氨酸、BCAA溶液对小鼠下丘脑中5-HT_1AR,5-HT_1BR ，5-HT_1DR,5-HT₃R 基因表达的影响
• 1AR,5-HT_1BR ，5-HT_1DR,5-HT₃R 基因的相对表达量及其与下丘脑中GABA 含量、下丘脑中Ghrelin 基因相对表达量的相关性分析'>3.3.2 下丘脑5-HT_1AR,5-HT_1BR ，5-HT_1DR,5-HT₃R 基因的相对表达量及其与下丘脑中GABA 含量、下丘脑中Ghrelin 基因相对表达量的相关性分析
• 3.4 腹腔注射色氨酸、BCAA 溶液对胃组织5-HT 与Ghrelin 的影响
• 3.4.1 腹腔注射色氨酸、BCAA 溶液对小鼠胃组织中5-HT 含量的影响
• 1AR,5-HT_1BR ，5-HT_1DR,5-HT₃R 基因的相对表达量与胃组织Ghrelin 基因相对表达量相关性分析'>3.4.2 胃组织5-HT_1AR,5-HT_1BR ，5-HT_1DR,5-HT₃R 基因的相对表达量与胃组织Ghrelin 基因相对表达量相关性分析
• 论文主要结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文