人参皂苷Rg1、Rh2对Aβ激活小胶质细胞IL-1β、iNOS和TNF-α表达的影响

论文摘要

目的:采用β—淀粉样蛋白（Aβ）激活小鼠小胶质细胞（BV-2）,测定活化的BV-2细胞白介素—1β（IL-1β）和诱生型一氧化氮合酶（iNOS）的表达,同时观察人参皂苷Rg1、Rh2对Aβ激活BV-2细胞表达IL-1β、iNOS和肿瘤坏死因子—α（TNF-α）的调节作用,为阿尔茨海默病（AD）的炎性反应机制及抗炎治疗提供体外实验依据。方法:用Aβ25-35激活BV-2细胞,同时用不同浓度人参皂苷Rg1、Rh2进行干预,观察细胞形态学、MTT法检测细胞活性、RT-PCR法观察IL-1β和iNOS mRNA的表达及免疫细胞化学染色方法检测TNF-α蛋白的表达。数据结果以均数±标准差表示,用SPSS11.5统计软件对数据进行统计分析。结果:Aβ在0～30μmol/L的浓度范围,作用时间小于36h及人参皂苷Rg1、Rh2单独作用对BV-2细胞活性无明显影响;Aβ15μmol/L分别与人参皂苷Rg1（≤40μmol/L）或Rh2（≤20μmol/L）作用BV-2细胞12h对其活性亦无明显影响。Aβ激活BV-2细胞,IL-1βmRNA表达对Aβ具有剂量依赖性,而各Aβ浓度组iNOS mRNA表达未见明显变化;IL-1β的表达达峰后在24h明显降低,iNOS则达峰较晚,在12h～24h内表达量保持稳定水平。用人参皂苷Rg1、Rh2干预Aβ激活的BV-2细胞,IL-1β、iNOS和TNF-α的表达较Aβ单独作用时下降。结论:与AD紧密相关的Aβ可激活BV-2细胞并使前炎症细胞因子和iNOS表达增加、放大炎性级联反应。人参皂苷Rg1、Rh2能够抑制激活的BV-2细胞内前炎症细胞因子表达,减轻炎症反应,并进一步抑制氧化应激反应,从而减轻对神经元的损伤,在AD发病中具有保护作用。这种保护作用可能与其抗氧化和抗炎活性有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词表
• 引言
• 第一部分 AD小胶质细胞模型建立
• 材料与方法
• 1.材料
• 1.1 研究对象
• 1.2 药品与试剂
• 1.3 主要仪器
• 1.4 试剂配制
• 2.方法
• 2.1 BV-2细胞培养
• 2.2 MTT法测定Aβ对BV-2细胞活性的影响
• 2.3 半定量RT-PCR检测IL-1β、iNOS mRNA的表达
• 2.4 细胞形态学观察
• 结果与分析
• 1.Aβ对BV-2细胞活性的影响
• 2.BV2细胞总RNA的提取和鉴定
• 3.各组BV2细胞iNOS和IL-1β mRNA的表达
• 4.形态学观察（见附图）
• 讨论
• 第二部分 人参皂苷Rg1、Rh2对Aβ激活小胶质细胞IL-1β、iNOS mRNA及TNF-α表达的影响
• 材料与方法
• 1.材料
• 1.1 研究对象
• 1.2 药品与试剂
• 1.3 主要仪器
• 1.4 试剂配制
• 2.方法
• 2.1 人参皂苷Rg1、Rh2对BV-2细胞活性的影响
• 2.2 人参皂苷Rg1、Rh2对Aβ激活BV-2细胞IL-1β和iNOS mRNA基因表达的影响
• 2.3 人参皂苷Rg1、Rh2对Aβ激活BV-2细胞TNF-α表达的影响
• 结果及分析
• 1.人参皂苷Rg1、Rh2对BV-2细胞活性的影响
• 2.人参皂苷Rg1和Rh2对IL-1β和iNOS基因表达的影响
• 3.人参皂苷Rg1和Rh2对TNF-α表达的影响
• 讨论
• 结论
• 问题与展望
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 综述 小胶质细胞在老年性痴呆中的免疫损伤和神经保护作用
• 在读期间公开发表论文情况