多囊卵巢综合征患者颗粒细胞FSHR、LHR、mRNA的表达

论文摘要

目的:多囊卵巢综合征（ polycystic ovarian syndrome,PCOS）是一种常见的生殖功能异常,也是无排卵性不孕的主要病因之一,其主要内分泌特征为高雄激素血症、高胰岛素血症、黄体生成素（LH）水平升高、LH与卵泡刺激素（ FSH）比值升高。临床上常表现闭经或月经稀发,无排卵和不孕。患者须通过药物诱导排卵方能解决生育问题。在药物促排卵过程中,卵巢的反应性存在明显的个体差异,与卵巢功能正常者相比,同样剂量的促排卵药物,PCOS患者更有可能出现OHSS,其原因尚不明了。本研究通过观察在我院接受体外受精与胚胎移植（invitro fertilization-embryo transfer, IVF- ET ）的PCOS患者与卵巢功能正常者在应用促排卵药物后,卵巢颗粒细胞中促卵泡激素受体（FSHR）、黄体生成素受体（LHR）mRNA的表达,并结合基础血清、垂体降调节后月经第2天、HCG日血清中性激素水平及及卵泡液中促卵泡激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、睾酮（T）水平变化,进一步探讨PCOS患者颗粒细胞中促性腺激素受体与对促排卵药物反应的关系。方法:1研究对象:1.1 PCOS组（实验组）:选择2007年5月-2007年10月在河北医科大学第二医院生殖中心接受IVF- ET治疗的多囊卵巢综合征患者24例,平均年龄在28.83±3.16岁。1.2对照组:随机选择同期在本生殖中心接受IVF-ET治疗的不孕患者20例,月经规律,不孕原因为输卵管因素,且基础血（月经第三天） FSH、LH、E2、T、催乳素（PRL）在正常范围内,平均年龄在30.17±3.21岁。所有患者均为初次进入周期,空腹血糖均正常,无全身性及其他内分泌性疾病,男方精液正常。2研究方法和测定内容:2.1标本采集:PCOS组和对照组均采用口服避孕药（达英-35）控制性超促排卵长方案治疗,根据阴道B超和血清中LH、E2水平检测卵泡发育。当B超显示下有一个卵泡平均直径≥18mm,两个卵泡平均直径≥17mm,或者三个卵泡平均直径≥16mm时,于当日21:00给予肌肉注射绒促性素（HCG）5000– 10000 iu,36小时后在阴道超声引导下行采卵术。取未被血染的穿刺液经2000 r/min离心10 min,上清液置-20℃冰箱保存。收集所有的卵泡穿刺液, Ficoll分离获得颗粒细胞,加入Trizol（Invitrogen）,置1.5ml EP管中,经液氮快速冷冻后于-70℃冰箱保存。2.2标本测定:RT-PCR测定颗粒细胞FSHR及LHR mRNA相对表达量。2.3内分泌激素测定:化学发光法测定基础血清FSH,LH,T,E2,空腹胰岛素水平（INS）,垂体降调节后月经第2天血清FSH、LH,HCG日血清LH,E2以及卵泡液FSH,LH,T,E2。结果:1 PCOS组和对照组间颗粒细胞FSHR、LHRmRNA相对表达量的比较1.1 PCOS组颗粒细胞FSHRmRNA相对表达量（0.675±0.106）较对照组颗粒细胞FSHRmRNA （0.567±0.132）增高,两组之间比较有统计学意义（P<0.05）。1.2 PCOS组颗粒细胞LHRmRNA相对表达量（0.647±0.123）较对照组颗粒细胞LHRmRNA （0.519±0.156）增高,两组之间比较有统计学意义（P<0.05）。2各指标之间的直线相关关系通过多元线性回归分析,显示获卵数与FSHRmRNA相对表达量呈正相关,与LHRmRNA相对表达量无明显直线相关关系。回归方程分别为PCOS组:Y=-22.18+50.51X, R2=0.66, F=20.36, P=0.0001;对照组:Y=-0.11+26.32X, R2=0.773, F=61.36, P=0.00013 PCOS组和对照组血清性激素浓度的比较基础血清中,LH、T、空腹胰岛素水平在PCOS组高于对照组,FSH,E2两组无统计学差异;垂体降调节后月经第2天血清FSH、LH在进行rhFSH治疗前无统计学差异。与对照组相比,PCOS组HCG日血清LH增高, E2两组相近。4 PCOS组和对照组卵泡液中性激素浓度的比较PCOS组患者卵泡液中FSH浓度（4.80±1.44 mIU/ml）,与对照组（6.47±0.95 mIU/ml）相比,明显降低（P =0.003）,而LH浓度、T水平明显升高（ P值分别为0.004,0.005）,有统计学意义。同时,两组患者卵泡液中E2浓度相近。5 PCOS组和对照组IVF周期特征比较两组患者rhFSH治疗总用量和时间无明显差异,hCG日最大血浆E2水平相近。然而PCOS组获卵数（21±8）高于对照组（15±4）,且平均卵泡直径PCOS组（18.02±1.80 mm）小于对照组（19.41±2.32mm）,P<0.05,有统计学意义。结论:1与对照组患者相比,PCOS患者基础血清睾酮（T）和胰岛素（INS）增高,超促排卵过程中总卵泡数增加而卵泡直径下降;PCOS卵泡液中FSH、P浓度明显降低,而LH浓度、T水平明显升高,同时,两组患者卵泡液中E2浓度相近,提示PCOS患者存在多种内分泌异常和卵泡发育异常。2超排卵过程中,颗粒细胞FSHR mRNA表达在PCOS组高于对照组,获卵数与颗粒细胞FSHRmRNA表达均成正相关,提示FSHRmRNA表达量与卵巢对外源性促性腺激素反应有关,FSHRmRNA的表达增高可能引起卵巢反应性增高,PCOS组获卵数及FSHRmRNA的表达高于对照组,推测FSHRmRNA的表达增高可能是PCOS患者易发生卵巢过度刺激的原因之一;而卵巢反应性与颗粒细胞LHR表达量无明显相关性。3超排卵过程中,颗粒细胞LHRmRNA表达在PCOS组高于对照组,推测PCOS卵泡可能存在提早的黄素化。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 多囊卵巢综合征患者颗粒细胞FSHR、 LHR mRNA 的表达
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 个人简历