复元胶囊对气虚血瘀证大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

论文摘要

目的:研究复元胶囊对气虚血瘀证大鼠血管平滑肌细胞（Vascular Smooth Muscle Cell,VSMC）凋亡及bax、bcl-2凋亡相关因子表达的影响,从细胞凋亡分子生物学角度探讨复元胶囊治疗气虚血瘀证的机制。方法:（1）造模。在18月龄SD大鼠48只中随机抽取40只,采用游泳、饥饿、惊恐、寒冷及高脂饮食等方法制作成大鼠气虚血瘀证模型后,随机分为5组,即Ⅱ组—模型组,Ⅲ组—芪参胶囊组,Ⅳ组—复元胶囊小剂量组,Ⅴ组—复元胶囊大剂量组,Ⅵ组—复元胶囊中剂量组,每组8只。剩余8只作为空白对照组。（2）给药。对Ⅲ组大鼠给予芪参胶囊灌胃(剂量:0.52g·kg -1);Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组大鼠给予复元胶囊灌胃(剂量分别为:0.15g·kg-1,1.35g·kg -1,0.45g·kg -1);Ⅰ组和Ⅱ组给予等容量生理盐水。各组每天灌胃一次,每次灌胃容量为1.33ml·100g-1,持续给药4周。（3）标本采取。将各组大鼠麻醉后取胸主动脉血管一段,迅速固定于4%多聚甲醛中,制成石蜡切片,做凋亡及免疫组化检测。另取一段迅速固定于2.5%戊二醛中,置于4°C冰箱保存,备电镜观察血管平滑肌细胞形态。（4）形态学观察。A. HE染色,光镜下观察血管平滑肌内膜、中膜情况。B.应用透射电镜观察各组血管平滑肌细胞超微结构。（5）血管平滑肌细胞凋亡的检测。采用缺口末端标记（TUNEL）法检测VSMC凋亡,计算血管平滑肌细胞的凋亡指数（apoptotic index, AI ）。（6）调控细胞凋亡信号因子的检测。应用免疫组化方法检测血管平滑肌细胞bax、bcl-2凋亡相关信号因子的表达。结果:（1）模型组与空白对照组比较,血管平滑肌细胞中的bcl-2蛋白表达明显增强（P<0.05）,bax蛋白表达明显减弱（P<0.05）,bcl-2/bax比值上升（P<0.05）,AI明显下降（P<0.05）。（2）复元胶囊大、中、小剂量组和芪参胶囊组与模型组比较,VSMC的bcl-2蛋白表达减弱（P<0.05）,bax蛋白表达明显增强（P<0.05）,bcl-2/bax比值下降（P<0.05）,AI上升（P<0.05）。其中,复元胶囊中剂量组bcl-2/bax比值及AI最接近正常组。结论:（1）气虚血瘀证大鼠VSMC存在严重凋亡不足,增殖和凋亡严重失调。（2）复元胶囊能改变bcl-2/bax表达比率,诱导细胞凋亡,从而改善了气虚血瘀证VSMC的增殖与凋亡平衡失调。（3）复元胶囊能保护性增加模型组大鼠VSMC的凋亡,调整增殖与凋亡平衡,其机制可能是通过调节凋亡相关因子bcl-2和bax的表达比率所致。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文：复元胶囊对气虚血瘀证大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响
• 前言
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 参考文献
• 全文总结
• 创新点及其意义
• 思考与展望
• 附图
• 文献综述一
• 文献综述二
• 文献综述三
• 致谢
• 攻读学位期间发表的论文