论文摘要
目的：2003年底，人类基因组测序计划已经完成，2004年在Nature杂志上公布了修正的人类基因组图谱，人类基因组计划已从结构基因组时代迈入功能基因组时代，未来主要任务就是定位人类基因，研究它们的生物学功能及基因间的相互作用等。最近研究发现人类总的基因数目为20，000-25，000个，比以前所估计的要少得多，但大多数基因功能未知。因此，克隆新基因并阐明这些基因的功能及其基因间的相互作用显得尤为重要。本研究在筛选新的靶分子时获得了一条人的新基因序列PCIA1，为尽快获得新基因的功能提示，需获取新基因的全长序列，进行初步的生物信息学分析，并进行初步的功能研究。 方法：本研究在重组cDNA表达文库的血清学分析（Serological analysis of recombinant cDNA expression library，SEREX）技术基础上，筛选到一个基因部分片段，生物信息学分析发现此基因为人的新基因的片段。我们采用RACE（Rapid Amplification of cDNA Ends）技术结合EST（Expressed Sequence Tags）序列拼接技术获得了新基因PCIA1的全长cDNA序列，用RT-PCR技术检测了该新基因的人的组织表达谱，以PCIA1和GFP融合蛋白及免疫组织化学检测PCIA1基因的亚细胞定位，并结合多种生物信息学手段对其可能的性质和功能进行初步的分析和预测。进而，为进一步研究该基因的功能，我们将PCIA1基因连接至原核表达载体pQE30，