论文摘要
目的 研究马桑内酯(Coriaria Lactone,CL)和缝隙连接通道阻滞剂1-庚醇(1-hepatal,1-hep)对模拟神经元兴奋环境下即给予高浓度kcl作用下的星形胶质细胞微丝F-actin的影响及其与缝隙连接通道的关系,以及它们在癫痫发病中的意义。 方法 利用改良McCarthy的方法培养星形胶质细胞,制备细胞爬片,并对培养的细胞进行不同干预分组:A.正常对照组;B.高浓度的kcl作用组;C.kcl+CL组;D.kcl+1-hep组;E.kcl+CL+1-hep组。每组再分为24,48小时作用时间亚组。采用直接免疫荧光法,用BODIPY FL phallacdin对星形胶质细胞F-actin进行荧光染色。用激光扫描共聚焦显微镜观察各组细胞骨架F-actin的结构及分布,同时测定F-actin含量。 结果 培养的星形胶质细胞经过GFAP免疫组化鉴定,阳性率达90%以上。用激光扫描共聚焦显微镜测定细胞骨架F-actin含量,发现高浓度的kcl作用于星形胶质细胞24h,48h后,F-actin的荧光强度较对照组升高(P<0.01),同时给予kcl+CL作用于星形胶质细胞24h,48h后F-actin的荧光强度较kcl组明显升高(P<0.01),而同时给予kcl+CL+1-hep组荧光强度较kcl+CL组明显降低(P<0.01)。同一因素作用下24h作用组与48h作用组荧光强度未见统计学差异(P>0.05)。结论CL可引起星形胶质细胞内F-actin含量的升高,而通道阻滞剂1
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