精制雄黄和白砒对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑瘤作用及对凋亡的影响

精制雄黄和白砒对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑瘤作用及对凋亡的影响

论文摘要

目的1.以宫颈癌裸鼠移植瘤为实验对象,探讨精制雄黄和白砒对宫颈癌的抑瘤效应和对裸鼠的毒性副反应。2.探讨精制雄黄和白砒对宫颈癌的细胞凋亡及细胞周期的影响,以分析精制雄黄和白砒的抑瘤机制。3.探讨精制雄黄和白砒对细胞凋亡相关蛋白Fas、Caspase-3和survivin的表达,分析精制雄黄和白砒诱导细胞凋亡的机制。方法1.将宫颈癌Hela细胞培养后,注射到裸小鼠的皮下,形成宫颈癌裸鼠移植瘤。将荷瘤小鼠随机分为模型组、卡铂组、白砒组、低剂量雄黄组、中剂量雄黄组、高剂量雄黄组、白砒+雄黄组,共7组,每组10只裸鼠。15天后处死全部裸鼠,完整取出肿瘤组织进行实验研究,取出肝、脾、肾、胃、大肠及小肠分析药物毒副作用。2.肿瘤组织匀浆后制成细胞悬液,PBS洗两遍,400目网过滤,调整细胞浓度为1×106个/ml。加Annexin V-FITC和PI双染色,上流式细胞仪测定检测细胞凋亡和细胞周期分布。3.将肿瘤组织切片后,用免疫组化SP法,检测肿瘤组织中的Fas、Caspase-3和survivin的蛋白表达水平。结果1.卡铂组、白砒组、精制雄黄中剂量组、高剂量组、白砒+雄黄组的肿瘤重量与模型组比较,均明显减轻(P<0.05),其抑瘤率分别为34.3%、35.8%、37.0%、33.1%、37.8%。提示精制雄黄和白砒有明显的抑瘤效应,与卡铂作用相当。肝、脾、肾、胃、大肠及小肠未见明显的毒性反应。2.精制雄黄低、中、高剂量组、卡铂组、白砒组、白砒+雄黄组肿瘤细胞的凋亡率与模型组比较,细胞凋亡率上升,具有显著性差异(P<0.05)。3.精制雄黄低、中、高剂量组、卡铂组、白砒组、白砒+雄黄组肿瘤细胞与模型组比较,在G0/G1周期的细胞比例明显增加,差异有显著性(P<0.05)。提示精制雄黄和白砒对肿瘤细胞的细胞分裂起到G0/G1期阻滞作用。4.各药物治疗组与模型组比较,Fas蛋白表达水平升高,有统计学差异(P<0.05);各药物治疗组与模型组比较,Caspase-3蛋白表达水平升高,有统计学差异(P<0.05);各药物治疗组与模型组比较,survivin蛋白表达水平降低,有统计学差异(P<0.05):结论1.精制雄黄和白砒对宫颈癌裸鼠移植瘤有明显的抑瘤效果,效果与卡铂相当。雄黄灌胃+局部注射联用法抑瘤效果较好,但抑瘤效果并未显示出剂量效应,低、中、高剂量的抑瘤效应相当,这可能与其难溶于水的物理特性有关。2.精制雄黄和白砒都有诱导宫颈癌细胞凋亡的功效。诱导癌细胞凋亡可能是其发挥抑瘤效应的机制之一。3.精制雄黄和白砒都能将宫颈癌细胞阻滞在G0/G1周期,延缓了癌细胞增殖的过程,有利于诱导细胞凋亡。4.精制雄黄和白砒能上调Fas和Caspase-3蛋白的表达,下调survivin蛋白的表达。上调Fas和Caspase-3蛋白的表达,下调survivin蛋白的表达是精制雄黄和白砒诱导宫颈癌细胞凋亡的机制之一。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 引言
  • 一、文献研究
  • (一) 宫颈癌的西医治疗现况
  • 1、宫颈癌的流行病学
  • 2、宫颈癌发病的高危因素
  • 3、宫颈上皮内瘤样变的西医治疗
  • 4、宫颈癌的综合治疗
  • 5、化疗在宫颈癌治疗中的作用及存在的问题
  • (二) 中医药学对宫颈癌的研究现状
  • 1、宫颈癌的病机
  • 2、宫颈癌的中医治疗原则
  • 3、宫颈癌临床中医治疗
  • 4、雄黄和白砒治疗肿瘤现况
  • 二、实验研究
  • (一) 精制雄黄不同用药方法对宫颈癌裸鼠移植瘤抑瘤效果的影响
  • (二) 精制雄黄与白砒对宫颈癌裸鼠移植瘤抑瘤效果的探讨
  • (三) 精制雄黄与白砒对宫颈癌细胞凋亡及细胞周期的影响
  • (四) 精制雄黄与白砒对宫颈癌组织中凋亡相关蛋白表达的影响
  • 结语
  • 参考文献
  • 附录
  • 在校期间发表的论文
  • 致谢
  • 相关论文文献

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