非小细胞肺癌中STAT3、CyclinD1及Ki67蛋白的表达及相关性研究

论文摘要

目的：检测非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer, NSCLC）组织与正常肺组织中信号转导与转录激活因子3（Signal transducer and activatorof transcription3, STAT3）、细胞周期素D1（cyclinD1）和Ki67蛋白的表达情况，探讨STAT3、cyclinD1和Ki67之间是否存在相关性，同时分析它们在NSCLC的发生、侵袭和转移中的作用。方法：通过免疫组织化学Envision二步法检测正常肺组织（20例）及NSCLC组织（30例）中STAT3蛋白、cyclinD1蛋白及Ki67蛋白的表达情况。所有NSCLC组织均来源于胸外科手术切除获得，患者未作任何放、化疗或其他抗癌治疗。在30例NSCLC组织中，男性20例，女性10例；年龄为35－76岁，＜60岁者16例，≥60岁者14例；鳞癌15例，腺癌15例；肿瘤直径≤3cm者8例，＞3cm者22例；有淋巴结转移者14例，无淋巴结转移者16例；Ⅰ-Ⅱ期者16例，Ⅲ-Ⅳ期者14例；高－中分化者19例，低分化者11例。所有标本予以10%福尔马林固定，石蜡包埋，4μm厚连续切片，切片常规脱蜡水化后，蒸馏水冲洗，磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline, PBS）浸泡，高温抗原修复，3％过氧化氢阻断内源性过氧化物酶活性，并用正常山羊血清封闭交叉反应。滴加一抗（STAT3兔抗人多克隆抗体，鼠抗人cyclinD1单克隆抗体，鼠抗人Ki67单克隆抗体）孵育，PBS冲洗后滴加Envision二抗孵育，PBS冲洗，DAB显色，苏木素复染，透明，封片观察。以胞质或胞核内出现棕黄色颗粒、网织状或棕褐色团块为阳性细胞。实验结果显示，STAT3蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞质；cyclinD1蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞核，部分位于细胞质；Ki67蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞核。按每张切片的阳性细胞比例及着色深浅划分－、+、++、+++四级，完全不表达或阳性表达少于5％者定为阴性（—）；阳性表达细胞在5％－25％之间者定为弱阳性（+），阳性表达细胞在26％－50％之间者为阳性（++），阳性表达细胞大于50％者为强阳性（+++）。结果：⑴STAT3蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较，差异有显著统计学意义（P<0.01）,在NSCLC组织中的表达高于正常肺组织；cyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较，差异有显著统计学意义（P<0.01）,在NSCLC组织中的表达高于正常肺组织；Ki67蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较，差异有显著统计学意义（P<0.01）,在NSCLC中的表达高于正常肺组织；⑵STAT3蛋白在NSCLC组织中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关（P＞0.05）；cyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关（P＞0.05）；同样，在NSCLC组织中，Ki67蛋白的表达也与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关（P＞0.05）；⑶STAT3蛋白和cyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性（P=0.787，P＞0.05）。⑷STAT3和Ki67蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性（P=0.341，P＞0.05）；⑸cyclinD1蛋白和Ki67蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性（P=0.673，P＞0.05）。结论：⑴STAT3蛋白在NSCLC中的表达增高，显著高于正常肺组织，同样，在NSCLC中cyclinD1蛋白和Ki67蛋白的表达也是增高的并且显著高于正常肺组织，说明过度表达的STAT3蛋白、cyclinD1蛋白和Ki67蛋白可能均参与了非小细胞肺癌的形成过程。⑵STAT3蛋白、cyclinD1蛋白和Ki67蛋白在NSCLC中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移和TNM分期无关，说明它们可能只在肿瘤发生过程中发挥作用，而与肿瘤进展、侵袭和转移无关。⑶STAT3蛋白与cyclinD1蛋白在NSCLC中的表达无相关性，提示STAT3没有通过上调cyclinD1的表达，从而促进细胞周期进展和细胞的恶性转化，促进肿瘤的形成。⑷在NSCLC中,STAT3蛋白与Ki67蛋白的表达之间也无相关性，说明STAT3没有功过上调Ki67的表达来诱导肿瘤的发生。⑸在NSCLC中，cyclinD1蛋白与Ki67蛋白的表达之间无相关性，说明它们在促进细胞转化，导致肿瘤的发生过程可能是各自独立发挥作用的，无协同作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 英汉缩略词对照表
• 致谢
• 综述
• 参考文献