论文摘要
脊髓小脑共济失调的主要病理改变是小脑、桥脑、下橄榄核萎缩,神经细胞脱失伴胶质增生。随着神经细胞移植技术的发展,为这类疾病患者开拓了一条新的治疗途径。近年来研究证实胚胎中枢神经系统存在着具有多分化潜能和自我更新能力的神经干细胞（NSC）。它们在一定的诱导条件下能够进行增殖,并可以向特定的方向进行分化,这使得中枢神经系统损伤和神经退行性疾病的NSC的替代治疗成为可能。 本实验首先构建症状稳定的脊髓小脑共济失调动物模型。将3-乙酰吡啶（3-AP）、二氢骆驼蓬碱、维生素PP按照不同的时间依次注射到成年健康SD大鼠的腹腔,观察大鼠的行为学改变和小脑、中脑和桥脑的形态学变化。结果发现,大鼠在接受注射的当天即出现平衡障碍和步态异常,其后症状逐渐加重,1周达到高峰,而后症状轻度缓解,2周后症状稳定。形态学显示,下橄榄核神经元丧失明显,小脑皮层中浦肯野细胞（Purkinje cell）轻度减少,中脑、桥脑的神经纤维紊乱,神经元内尼氏小体崩解。通过该方法建立的动物模型症状稳定,为下一步的移植实验打下基础。 为了获取更多的具有分化潜能的神经前体细胞,本实验采用从孕13周（E13）的胚胎小脑区域分离细胞,在无血清培养基上,利用表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维生长因子（FGF2）在体外进行扩增。结果显示,在此条件下,小脑前体细胞可以稳定扩增,并可以分化为神经元和胶质细胞。通过比较神经干/祖细胞在不同分化条件下神经细胞的分化,我们发现在撤除了有丝分裂原的小脑组织上清培养液中,分化为神经元的细胞最多。因此通过这种方法得到的细胞,可以成为神经移植的细胞来源。 在上述实验的基础上,我们将从小脑分离得到的神经干/祖细胞,在体外进行扩增,并在一定的条件下,适度诱导分化,然后将其移植入SCA大鼠的小脑内。通过观察大鼠的症状改善情况和步距测量来评判移植的效果。通过病理组织学和免疫组织化学法检测移入细胞的生存和分化。结果发现:移植术后2周,大鼠症状开始改善,1月时症状改善最好,之后又有所加重。形态学发现移植的细胞可以在模型鼠的小脑内存活,并可以分化为神经元和神经胶质细胞。 在本次实验中,旨在探讨以下几方面内容:1.构建的脊髓小脑共济失调动物模型能否作为移植受体;2.胚胎小脑内能否分离获取到神经干/祖细胞,以及其分化情
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标签：脊髓小脑共济失调论文; 大鼠论文; 神经前体细胞论文; 细胞培养论文; 移植论文;