盐酸氨溴索的HPLC分析方法及其制剂生物等效性研究

论文摘要

建立了简便、灵敏、重现性好的反相高效液相色谱法,并对其实验条件进行了优化：以利多卡因为内标,血浆样品用乙醚提取,醚层经0.01 mol/L盐酸萃取后进样,采用Scienhome C18 （200 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱和甲醇：乙腈：50mmol/L磷酸盐缓冲液（pH=7.0）：四氢呋喃（35：35：27.5：2.5, v/v/v/v, pH7.0）为流动相,流速1.0 mL/min,进样量50μL,柱温为室温,检测波长245nm的色谱系统。实验测得盐酸氨溴索的保留时间约为6.8min、内标物利多卡因的保留时间约为7.8min,两峰的分离度大于1.5,两峰的脱尾因子均小于1.2。典型标准曲线为y=8.0038x+0.091 r=0.9994。线性范围为20.0-320ng/mL,定量下限为20.0 ng/mL。日间精密度的RSD为3.8-10.0%,日内精密度的RSD为4.5-8.4%。上述测定盐酸氨溴索血药浓度的HPLC法灵敏、准确可靠、简便易行,可用于人体内盐酸氨溴索的药代动力学研究及药品的质量控制。采用上述高效液相色谱法,对受试制剂和参比制剂进行了人体生物等效性研究。采用双周期两制剂交叉实验设计,对22名健康受试者单次给药,并对其体内血药浓度进行测定,单剂量给药实验结果表明：受试制剂和参比制剂中盐酸氨溴索的达峰时间Tmax分别为2.00±0.15（均值±标准差,下同）和2.02±0.11h,最大血药浓度Cmax分别为159.6±38.80和159.3±45.90ng/ml,用梯形法计算,血药浓度-时间曲线下面积AUCot分别为1145.9±281.8和1095.5±296.7ng·h/mL, AUC0-8分别为1370.9±329.3和1322.9±360.3ng·h/mL,以AUC0-t计算,与参比制剂相比受试制剂中盐酸氨溴索的相对生物利用度平均为105.7±10.14%。根据普通制剂的生物利用度和生物等效性实验的要求,受试制剂与参比制剂比较,经方差分析和双单侧t检验,AUC、Cmax、Tmax均符合生物等效性要求。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 第一章 前言
• 1.1 盐酸氨溴索简介
• 1.1.1 基本情况
• 1.1.2 作用机理
• 1.1.3 临床应用
• 1.1.4 独特机制
• 1.1.5 国内外有关该品种的临床使用情况
• 1.1.6 盐酸氨溴索片的质量标准
• 1.2 盐酸氨溴索分析方法的研究现状
• 1.2.1 盐酸氨溴索体外分析方法
• 1.2.2 盐酸氨溴索体内分析方法
• 1.3 生物利用度及生物等效性简介
• 1.3.1 基本概念及应用
• 1.3.2 研究方法
• 1.4 本课题的研究目的和内容
• 第二章 HPLC法测定血浆中盐酸氨溴索浓度
• 2.1 引言
• 2.1.1 分离原理
• 2.1.2 定性和定量方法
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器和试剂
• 2.2.2 溶液的配制
• 2.2.3 色谱条件
• 2.2.4 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 分析方法的选择
• 2.3.2 色谱条件的选择
• 2.3.3 定量方法的选择
• 2.3.4 血浆样品的预处理方法
• 2.3.5 分析方法的确证与实施
• 2.4 小结
• 第三章 盐酸氨溴索两种制剂在人体内的生物等效性研究
• 3.1 概述
• 3.1.1 生物样本分析方法的建立和确证
• 3.1.2 生物等效性实验设计与操作
• 3.1.3 数据处理及统计分析
• 3.1.4 结果评价
• 3.1.5 临床报告内容
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器和试剂
• 3.2.2 研究对象
• 3.2.3 实验设计方案
• 3.2.4 血浆样品的处理
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 血浆样品测定结果分析
• 3.3.2 数据分析检验处理
• 3.4 小结
• 第四章 结论与展望
• 参考文献
• 致谢