重组β-防御素2多肽对脓毒症大鼠肺组织内细胞凋亡的影响

论文摘要

背景 脓毒症（Sepsis,又称全身性感染）指机体感染后所致的全身性炎症反应综合征,它是创（烧）伤、失血性休克、感染、外科大手术后常见的并发症,系非肿瘤疾病的第一死因。 炎性细胞激活、炎症介质产生/释放失控所致的全身促炎反应和抗炎反应间的失平衡及机体免疫功能紊乱、凝血-抗凝-纤溶系统的失平衡是脓毒症发生发展的关键。 细胞凋亡是真核细胞持自稳态而具有的一种生理性死亡机制。一般情况下凋亡是许多正常生理过程所必需。细胞增殖与凋亡的平衡是机体维持自稳态的必需前提。但在许多病理条件下,凋亡的调节失衡在疾病的发生发展中起很重要的作用。国内外研究显示,脓毒症后淋巴细胞和实质器官细胞凋亡显著增加,表明细胞凋亡机制参浙江大学硕士学位论文与了脓毒症的发生与发展。 肺组织和肝脏,作为炎性细胞浸润、炎性介质的产生与作用的组织,在脓毒症发病机理及防治的研究中具有非常重要的地位。p-防御素2是肺组织和皮肤等上皮细胞产生的小分子抗微生物肤,它不仅具有杀伤病原微生物的活力,且具有趋化作用、调理吞噬作用等生物学活性,在抗感染的天然免疫和获得性免疫应答中起着重要作用。 若能阐明p一防御素2对脓毒症肺组织中细胞凋亡影响及机理将有助于脓毒症发病机理的深入和新药的研发。研究目的 采用大鼠盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症模型,复制缺陷型重组腺病毒载体表达系统获取在真核细胞内高表达的p一防御素2多肤,观察重组p一防御素2多肤对脓毒症大鼠肺组织的病理变化和细胞凋亡的影响,探讨重组p一防御素2多肤对脓毒症大鼠肺组织的保护作用及其可能的机制。浙江大学硕士学位论文材料与方法 36只雄性成年健康清洁级S一D大鼠随机分成对照组和实验组,每组各18只。对照组:气管内预注50pl（5 x105PFu）对照腺病毒（Ad一lacz）（不含p一防御素2编码基因）;实验组:气管内预注50pl（SX10,pFU）重组腺病毒（Ad一rBnZ）（含有p一防御素2编码基因）。于注入腺病毒48h后,两组大鼠均行盲肠结扎穿孔（CLP）复制脓毒症模型。于CLP后12h、36h、72h3个时间点（每个时间点两组大鼠各为6只）颈椎脱臼法处死大鼠,收集肺组织。观察肺组织病理切片（HE染色）,以透射电镜、脱氧核糖核.昔酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL法）检测细胞凋亡。结果 HE染色可见,大鼠CLP后肺泡间隔增宽,间质水肿,肺泡腔狭窄,炎症细胞渗出。与对照组相比较,各时间点的实验组大鼠肺组织炎症细胞渗出减少,间质水肿减轻。 TUNEL检测结果,CLP后大鼠肺组织内发生细胞凋亡,凋亡细胞包括支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、血.管内皮细胞以及炎症细胞,实验组凋亡指数较对照组低。 透射电镜证实凋亡发生,凋亡细胞染色质浓集,边聚,核固缩,胞膜完整。

论文目录

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