黄山贡菊有效成分分离及质量评价

论文摘要

菊花（Chrysanthemum morifolium Ramat.）为菊科植物的头状花序，拥有悠久药用历史的大宗常用药材，被广泛应用于许多行业领域。这正是菊花功效成分的清热解毒、平肝明目、疏风散热等药效作用，使得菊花在许多领域的年需求量在不断增长。但是由于品种、产地、来源的不同易造成药材组分存在较大的差异，从而使贡菊药材质量及稳定性不可控。长期以来菊花药材质量研究方法主要集中在少数几个成分（如绿原酸、木犀草苷、3,5-二氧咖啡酰基奎宁酸），不能全面反映菊花药材的组分特征。本研究针对这些情况，先对黄山贡菊活性成分进行了提取分离，纯化后得到多个单体化合物；为了全面控制黄山贡菊药材质量，采集黄山贡菊4个主要种植地（黄山市三县一区）的贡菊药材样品13份，进行了贡菊指纹图谱的研究。另外，还探索了其它品种菊花的指纹图谱特征，为不同品种菊花的区分提供依据。首先，黄山贡菊药材用70%乙醇溶液超声提取，离心后提取液经减压浓缩，得提取物。利用XAD-1600大孔吸附树脂柱色谱、中压反相柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱等现代色谱分离技术对黄山贡菊中酚酸类及黄酮类进行化学活性成分研究，从中分离得到了8个单体化合物。通过UV、1H-NMR、13C-NMR、MS、HRMS等现代波谱技术并结合TLC、HPLC等色谱手段对单体化合物进行结构鉴定，分别为绿原酸（1）、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸（2）、木犀草素-7-O-6″-丙二酰基葡萄糖苷（3）、木犀草苷（4）、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸（5）、3,4,5-O-三咖啡酰奎宁酸（6）、1,5-O-二咖啡酰奎宁酸（7）、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸（8），其中有6个酚酸类化合物，2个黄酮类化合物，木犀草素-7-O-6″-丙二酰基葡萄糖苷为首次在菊花中分离得到。其次，利用HPLC法建立了13个黄山贡菊样品的指纹图谱，该方法采用色谱柱为Zorbax Eclipse Plus Phenyl-Hexyl，以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈体系为流动相，流速1.0mL/min，进行梯度洗脱，检测波长为327nm，柱温为30℃，进样量为5μL。并运用药典委员会编写的―中药色谱指纹图谱相似度系统2004A‖软件计算菊花样品的相似度，相似度结果表明：13个不同种植基地、不同采收批次、不同年份的黄山贡菊被正确区分出来，相似度在0.96～1.00之间，而与其他品种菊花样品的相似度均小于0.86。所建立的贡菊指纹图谱具有精确性，稳定性，重现性好等优点，且可为黄山贡菊的质量控制和种属区分提供依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 2 引言
• 2.1 本研究目的和意义
• 2.2 主要研究内容
• 2.2.1 贡菊化学成分提取、分离纯化及鉴定
• 2.2.2 贡菊 HPLC 指纹图谱的建立
• 3 材料与方法
• 3.1 供试材料
• 3.2 仪器与试剂
• 3.2.1 主要仪器和设备
• 3.2.2 主要试剂
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 菊花粉碎
• 3.3.2 菊花供试液制备
• 3.3.3 贡菊成分分离纯化及鉴定方法
• 3.3.4 建立贡菊 HPLC 指纹图谱的方法
• 4 结果与分析
• 4.1 贡菊成分结构鉴定
• 4.2 贡菊 HPLC 指纹图谱建立
• 4.2.1 色谱条件的确立
• 4.2.2 精密度实验
• 4.2.3 重复性实验
• 4.2.4 稳定性实验
• 4.3 贡菊 HPLC 指纹图谱分析
• 4.3.1 贡菊样品 HPLC 指纹图谱共有峰的确定
• 4.3.2 菊花药材相似度分析
• 5 讨论
• 6 结论
• 6.1 分离并鉴定了黄山贡菊中 8 种化学成分
• 6.3 建立了贡菊 HPLC 指纹图谱研究方法
• 6.4 解析了贡菊 HPLC 指纹图谱中色谱峰
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 个人简介