芪丹通脉片对缺血/再灌注损伤大鼠心肌中NF-κB表达的影响

论文摘要

研究背景与目的心肌缺血/再灌注损伤（ischemia reperfusion injury, IRI）是指心肌在缺血基础上恢复血流后组织损伤加重的病理现象,是目前临床冠状动脉搭桥术、经皮冠脉腔内成形术等心脏介入性治疗常见的严重并发症。其发生机制主要包括:钙超载、自由基产生、代谢障碍和炎症反应等。目前的研究表明,在心肌IRI早期核转录因子κB（nuclear factor-kappa B, NF-κB）即能被激活,其激活因素可能为心肌缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）后造成的氧化应激、钙离子超载、游离基、一氧化氮（nitrogen monoxidum, NO）和内毒素等。缺血引起的NF-κB的早期激活是调节心脏炎症细胞因子基因表达的急性分子机制,其活性的增加可能与I/R期间即刻早期炎症基因表达的调节有关。既往研究表明,芪丹通脉片（Qidantongmai Tablet, QDTMT）能够抑制Ca2+内流,降低心肌细胞及其线粒体Ca2+中含量,减轻钙超载,可增加心肌线粒体超过氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、谷胱甘肽过氧物酶（glutathione peroxidase, GSH-Px）活性,降低线粒体丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量,以有效地消除或抑制氧自由基（oxygen free radical, OFR）的破坏作用,缩小缺血和I/R所致的心肌梗死面积,提高心肌的抗氧化能力,改善心功能;还能抑制血小板聚集,改善冠脉循环的作用,从而延缓和减轻缺血缺氧对血管内皮细胞和心肌细胞的损伤过程,以达到抗心肌缺血的目的。为了进一步探讨QDTMT保护IRI心肌的机制,我们采用冠脉结扎法复制大鼠心肌IRI模型,观察QDTMT对实验性大鼠IRI心肌细胞中NF-κB表达的影响。研究方法及内容1.健康雄性SD大鼠48只,体质量220-250 g,随机分为6组,每组各8只:假手术组,模型组,QDTMT高剂量组（3.24 g/kg）,中剂量组（1.08 g/kg）,低剂量组（0.36 g/kg）及恬尔心组（5 mg/kg）。用等体积生理盐水或药液每日灌胃1次,连续7 d。于末次灌胃40 min后采用冠状动脉结扎法造模。模型组及各给药组结扎冠脉30 min,再灌注2 h;假手术组只穿线不结扎。2.实验结束时速取再灌注区心肌组织,其中一部分于-70℃冻存留做Western blot,另一部分固定留做免疫组化染色。3.造模手术全过程纪录心电图。分别采用免疫组化的方法和Western blot方法检测各组心肌细胞中NF-κB蛋白的表达。实验结果1.与模型组相比较,QDTMT高剂量组和恬尔心组均能减慢I/R大鼠的心率,减轻ST段抬高程度。2.免疫组化染色法检测NF-κB,相对定量分析的结果显示,与假手术组相比较,模型组和QDTMT各剂量组NF-κB的表达显著增加（P<0.01）;与模型组相比较,QDTMT各剂量组和恬尔心组NF-κB的表达显著减少（P<0.01）;与恬尔心组相比较,QDTMT中、低剂量组NF-κB的表达显著增加（P<0.01）。3. Western blot法检测NF-κB,与假手术组相比较,其余各组NF-κB蛋白的表达均显著增加（P<0.01）。与模型组相比较,QDTMT各剂量组和恬尔心组中NF-κB蛋白的表达均显著减少（P<0.01）。与QDTMT高剂量组相比较,QDTMT中、低剂量组中NF-κB蛋白的表达均显著增加（P<0.01）,恬尔心组中NF-κB蛋白表达的水平无显著差异（P>0.05）。结论与提示1. QDTMT各剂量组在I/R过程中,可能通过减慢I/R大鼠的心率,降低ST段抬高程度,以减轻IRI。2. QDTMT可能通过抑制NF-κB的表达以减轻心肌细胞的炎症反应,这可能是QDTMT抗心肌IRI的机制之一。3. QDTMT高剂量组抑制NF-κB表达的作用与恬尔心组的作用无显著性差异,提示二药可能有相似的抗IRI作用。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢