促进造血干细胞增殖与血红蛋白合成营养组合物的实验研究

论文摘要

目的:以乙酰苯肼、X射线、环磷酰胺联合应用的方法建立小鼠再生障碍性贫血动物模型,用以评价促进造血干细胞增殖与血红蛋白合成营养组合物对小鼠再生障碍性贫血造血功能的影响。方法:BALB/c小鼠100只,适应性喂养1周后,随机分为:正常对照组、再障模型组及不同剂量的营养组合物组。采用皮下注射乙酰苯肼100mg/kg,次日X射线2.0Gy照射后,于试验第5天环磷酰胺80 mg/kg腹腔注射,第15天重复以上步骤但不给予射线处理的方法建立再生障碍性贫血小鼠模型,以铅砖屏蔽施以假照射及单纯等量生理盐水相应部位注射为正常对照组。试验第7天开始,营养组合物高、中、低剂量组小鼠每天灌胃,分别给予1445.55,963.7,674.59 mg/（kg·d）营养组合物,直至第45天,颈椎脱臼法处死小鼠,观察试验小鼠的血象、骨髓象、造血细胞内的线粒体、造血干细胞集落的形成及肝脏、脾脏的病理变化。结果:1.试验第7天,与正常对照组比较,其余各组小鼠陆续出现皮毛凌乱,光泽度降低,反应迟钝,行动迟缓,饮食量减少,其中以再障模型组最为明显,不同剂量的营养组合物组与再障模型组比较,小鼠精神状态渐佳,进食量增大。此外,再障模型组小鼠体重与正常对照组相比下降明显（*p<0.05）。各营养组合物组体重较模型对照组明显增高（*p<0.05）。2.与正常对照组比较,再障模型组小鼠外周血象三系细胞显著降低（*p<0.01）;与再障模型组比较,营养组合物高、中、低剂量组均能显著提高再障小鼠外周血象三系细胞水平（*p<0.01）。外周血涂片显示,与正常对照组相比,再障模型组小鼠白细胞减少,其中以中性粒细胞减少尤为明显,而淋巴细胞比例相对增多;不同剂量的营养组合物组与正常对照组则无显著性差异（*p<0.05）。再障模型组小鼠促红细胞生成素（EPO）含量明显高于正常对照组,且EPO与RBC、Hb均呈负相关。而不同剂量的营养组合物组与再障模型组比较,促红细胞生成素（EPO）由于代偿作用含量降低（*p<0.01）;并呈剂量-效应关系。3.再障模型组小鼠骨髓有核细胞数与正常对照比较,显著减少（*p<0.01）;与再障模型组的骨髓有核细胞数比较,营养组合物各剂量组骨髓有核细胞数增加（*p<0.05）。骨髓透射电镜显示,不同剂量的营养组合物组与再障模型组比较,同类造血细胞内线粒体数目明显增多（*p<0.01）。4.造血干细胞集落实验证明,再障模型组小鼠造血干细胞集落的数量明显减少,与正常对照组比较差异显著（*p<0.01）;营养组合物高、中、低剂量组干细胞集落形成率均明显高于再障组（*p<0.01）,且呈剂量-效应关系。5.肝、脾的病理切片显示,再障模型组小鼠肝脏组织水肿明显,小叶结构欠清晰,肝血窦及中央静脉扩张、充血;脾组织结构疏松,脾小体个数减少。不同剂量的营养组合物组与再障模型组相比,肝脏组织水肿减轻,小叶结构明显清晰,肝细胞形态正常;脾脏虽仍有部分充血,但脾小体个数较再障模型组明显增多。结论:1.采用乙酰苯肼、X射线、环磷酰胺联合应用的方法建立的再生障碍性贫血小鼠模型,外周血和骨髓的病理变化持续、稳定,符合再生障碍性贫血的临床表现。此方法简便,成功率高,有利于药物筛选应用。2.营养组合物对再障小鼠骨髓的损伤有显著改善作用,明显促进再障小鼠外周血细胞生成和骨髓造血干细胞的增殖;有助于再障小鼠骨髓造血细胞内线粒体的增加;且对再障小鼠肝、脾的损伤具有明显恢复作用。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 第一部分 乙酰苯肼、X 射线、环磷酰胺联合复制小鼠再生障碍性贫血模型
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• （五） 第二部分 促进造血干细胞增殖与血红蛋白合成营养组合物的实验观察
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• （六） 结论
• （七） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢
• 四、在读期间发表论著情况