论文摘要
目的研究人类巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）感染对HEL细胞周期、MCM2和MCM8表达的影响，探讨HCMV感染可能的发病机制。方法用HCMV感染血清饥饿法同步化的人胚肺成纤维细胞（human embryonic lung fibroblastic,HEL）。HCMV感染作为感染组，同时设非感染组为对照组，用流式细胞仪检测细胞周期。用倒置相差显微镜观察两组细胞形态学改变至感染后7天。于HCMV感染后12h（hour）、24h、48h、72h和96h收获细胞，提取总RNA，采用半定量逆转录—聚合酶链反应技术（RT—PCR）检测HEL细胞MCM2和MCM8的表达水平。结果1、非感染组未发现细胞形态学改变。感染组感染HCMV 48h后，可见细胞变形显著，部分梭形细胞变成突起丰富的单个球形细胞，72h后病变更加明显，细胞绝大部分变成圆形、椭圆形，胞体及胞核增大，胞质混浊，细胞透光性降低。7天时可见所有感染细胞均发生类似病变。2、感染组在感染后12h有71.4％的HEL细胞处于G1期，24h仍有70.2％的细胞处于G1期。非感染组在感染后12h有63.5％的HEL细胞处于G1期，24h有45.5％的细胞处于G1期。两组比较，均有显著性差异（P＜0.01）。3、12h、24h、48h、72h、96h两组细胞MCM2和MCM8 mRNA表达水平均有显著性差异（P＜0.05），12h和24h时感染组表达水平低于非感染组，48h、72h、96h时感染组表达水平明显高于非感染组。在上述5个时间点中，非感染组MCM2、MCM8 mRNA表达水平的高峰出现在感染后24h，而感染组表达水平的高峰则出现在感染后48h，较之有明显滞后。结论：1、HCMV感染影响了HEL细胞周期，大部分HEL细胞停滞在G1期。2、HCMV感染能诱导MCM2及MCM8 mRNA表达异常，使HEL细胞MCM2及MCM8 mRNA表达水平迟滞，这可能是HCMV感染导致细胞周期阻滞于G1期的机制之一。