盲肠结扎穿孔脓毒症致急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞与血管内皮细胞变化及相关性研究

盲肠结扎穿孔脓毒症致急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞与血管内皮细胞变化及相关性研究

论文摘要

目的:本实验采用盲肠结扎穿孔脓毒症致急性肺损伤模型,动态观察脓毒症大鼠早期肺泡巨噬细胞变化与肺脏血管内皮细胞损害情况,初步探讨两者是否具有一定的相关性及其可能机理。方法:SD大鼠66只,雌雄不拘,随机分为3组:(1)正常对照组(n=6),动物于麻醉后,称重,经腹主动脉采血,采用酶联免疫分析法检测血清E-选择素,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。大鼠处死,分离双肺,反复冲洗肺泡3次,收集肺泡灌洗液,采用酶联免疫分析法测定巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)水平,采取少许肺中叶组织行电镜观察血管内皮细胞(VEC)和肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)损伤情况,用电子秤称量肺脏湿重,于80℃烤箱留存48h后,称量肺脏干重。并计算肺湿重/干重(W/D)、肺系数、肺水含量;(2)假手术组(n=30),动物麻醉后行盲肠探查术后关闭腹腔,分别于术后3h,9h,24h,36h和48h五时点行与正常对照组相同的操作步骤,每时相点6只大鼠;(3)脓毒症组(n=30),动物行盲肠结扎穿孔(CLP)术后3h,9h,24h,36h和48h五时点行与正常对照组相同的操作步骤,每时相点6只大鼠。结果:1.脓毒症组在CLP术后3h肺泡灌洗液MIP-1α水平即升高,与正常对照组和假手术组相比差异有统计学意义(p<0.05),且逐步升高,在24h达峰值(1.45±0.34 ng/ml),在36h时点有下降表现,但仍高于正常对照组和假手术组(p<0.05)。2.血清TNF-α水平在CLP术后即明显高于正常对照组与假手术组(p<0.01),在24h达峰值(390.94±27.70 pg/ml),随后有下降趋势,但仍显著高于正常对照组和假手术组(p<0.01)。3.CLP术后3h血清E-选择素水平开始升高(0.26±0.02ng/ml),显著高于正常对照组与假手术组(p<0.05),在24h达峰值(0.40±0.01ng/ml),随后有下降趋势,但仍高于正常对照组和假手术组(p<0.05)。4.肺脏湿重/干重(W/D)值、肺系数、肺水含量在CLP术后均明显高于正常对照组(p<0.05)和假手术组(p<0.05),随时间推移,比值逐渐上升,且在各时间点均明显高于正常对照组(p<0.01)与假手术组(p<0.05)。以上指标在假手术组术后各时间点均明显高于正常对照组(p<0.05),有统计学意义。5.电镜下观察肺脏血管内皮细胞(VEC)和肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)在脓毒症发展过程中损害逐渐加重,且根据《黎鳌烧伤学》血管内皮超微结构损伤评分标准,内皮细胞损伤程度随时间推移分值逐渐增高。ATⅡ正常形态维持其正常功能,本实验中ATⅡ正常形态逐渐破坏。6.肺泡灌洗液巨噬细胞炎症蛋白-1α与血清E-选择素采用SPSS13.0统计软件包分析,两者存在显著正相关,F=5.557,P<0.05,相关系数为0.407,P<0.01.得回归方程为:y(MIP-1α)=0.504+1.814x(E-selectin).结论:1.在脓毒症致急性肺损伤发病过程中,肺泡巨噬细胞可能有助于加大肺脏的炎症损伤,而高炎症状态,可增加肺血管通透性,有助于肺水肿的形成,在脓毒症致急性肺损伤发病中发挥重要重要。2.肺泡巨噬细胞聚集程度与血管内皮细胞损伤程度具有显著正相关,提示肺泡巨噬细胞和血管内皮细胞在肺损伤过程中可能发挥重要作用。

论文目录

  • 英文缩略词表
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  • 论文正文 盲肠结扎穿孔脓毒症致急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞和血管内皮细胞变化及相关性研究
  • 引言
  • 材料与方法
  • 一、 主要试剂
  • 二、 主要仪器
  • 三、 实验动物模型与分组
  • 四、 标本采集与处理
  • 五、 标本检测及方法
  • 六、 统计学处理
  • 结果
  • 一、肺泡灌洗液 MIP-1α检测果
  • 二、 血清 TNF-α的检测结果
  • 三、 血清 E-选择素的检测结果
  • 四、 肺脏湿重/干重(W/D)值,肺系数,肺水含量的检测结果
  • 五、 肺脏血管内皮细胞电镜下变化
  • 六、 肺泡Ⅱ型上皮细胞电镜下变化
  • 七、 血管内皮细胞损伤程度评分结果
  • 八、 肺泡灌洗液巨噬细胞炎症蛋白-1α与血清 E-选择素的相关性
  • 讨论
  • 一、脓毒症致急性肺损伤早期肺泡巨噬细胞变化
  • 二、脓毒症致急性肺损伤早期血管内皮细胞变化
  • 三、脓毒症致急性肺损伤早期肺脏组织损伤
  • 四、脓毒症致急性肺损伤早期肺泡巨噬细胞变化与内皮细胞损伤的关系
  • 结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 照片
  • 综述 脓毒症相关性急性肺损伤发病机制研究进展
  • 参考文献
  • 个人简历
  • 致谢
  • 相关论文文献

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