AcSDKP对真皮成纤维细胞增殖及细胞外基质合成的影响

论文摘要

创面的异常修复导致增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的形成在临床工作中非常常见,其发病机理仍不完全清楚。迄今研究已经表明:皮肤组织中成纤维细胞的过度增殖以及细胞外基质的合成与降解失衡是导致病理性瘢痕形成的基础;生长因子和转录因子在不同水平协同作用调控着细胞外基质的代谢过程,因而,细胞外基质的代谢异常与它们的调节作用密切相关。大量研究表明,TGF-β可刺激成纤维细胞产生多种基质蛋白、基质蛋白酶抑制剂和整合素受体,增加细胞外基质（ECM）的生成,调节伤口中各细胞间的相互作用,在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的形成过程中发挥着重要作用。本课题通过观察N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对真皮成纤维细胞增殖及胶原合成的影响,探讨其在瘢痕防治中的应用价值,在此基础上,又进一步观察其对真皮成纤维细胞自分泌TGF-β1的影响,探讨其抑制胶原合成的可能作用机制,为AcSDKP防治病理性瘢痕的研究奠定基础。第一部分AcSDKP对真皮成纤维细胞增殖及胶原合成的影响目的:通过观察N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对真皮成纤维细胞增殖及胶原合成的影响,探讨其在瘢痕防治中的应用价值。方法:真皮成纤维细胞的原代培养及鉴定后,不同浓度的AcSDKP（10-7,10-8,10-9,10-10,10-11 mol/l）进行干预,另设立空白对照组。WST-8法检测真皮成纤维细胞增殖;RT-PCR技术检测人真皮成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达。结果:与空白对照组相比,10-10mol/l AcSDKP抑制人真皮成纤维细胞增殖作用最强;10-8mol/l和10-9mol/l AcSDKP对Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的抑制作用最显著。结论:本实验发现AcSDKP能够抑制人真皮成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的合成,有望应用于病理性瘢痕的防治。第二部分AcSDKP对真皮成纤维细胞自分泌TGF-β1的影响目的:通过观察N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对真皮成纤维细胞表达TGF-β1的影响,,探讨其抑制胶原合成的可能作用机制,并为AcSDKP防治病理性瘢痕的研究奠定基础。方法:真皮成纤维细胞的原代培养及鉴定后,给予不同浓度AcSDKP（10-7,10-8,10-9,10-10,10-11 mol/L ）干预,设立空白对照组。酶联免疫法检测培养细胞上清液TGF-β1含量;RT-PCR技术检测真皮成纤维细胞TGF-β1mRNA表达。结果:与空白对照组相比,10-8,10-9,10-10mol/L AcSDKP可使培养细胞上清液中的TGF-β1显著减少,各浓度组间差异无显著性;10-7,10-8,10-9,10-10 mol/L AcSDKP对TGF-β1 mRNA表达有显著的抑制作用,且各浓度组间的抑制作用无差异;结论:AcSDKP能够抑制真皮成纤维细胞自分泌TGF-β1,可能是其影响真皮成纤维细胞胶原合成的机制之一,AcSDKP有望应用于病理性瘢痕的防治。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一部分 AcSDKP 对人真皮成纤维细胞增殖及胶原合成的影响
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 5. 结论
• 参考文献
• 第二部分 AcSDKP 对人真皮成纤维细胞自分泌TGF-β1 的影响
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 5. 结论
• 参考文献
• 全文结论
• 综述
• 缩略词表
• 攻读学位期间公开发表论文
• 致谢