灰霉病菌对啶菌噁唑的敏感性及抗药性风险评估

论文摘要

灰霉病是蔬菜作物的重要病害之一,由其造成的经济损失严重。生产上以化学防治为主,但化学防治与病原菌群体产生抗药性的矛盾日益突出。由沈阳化工研究院研制的啶菌噁唑是一种新型杀菌剂,作用方式独特,对灰霉病有特效。在河北省地区还未大面积应用。鉴于灰霉病菌(Botrytis cinerea)已对大多数内吸性药剂产生抗药性,有必要研究灰霉病菌对新型药剂啶菌噁唑的抗药性。本研究在啶菌噁唑与其他药剂之间的交互抗性关系、灰霉病菌对啶菌噁唑敏感性基线、室内抗药性风险评估和抗感啶菌噁唑菌株生理生化性状比较以及啶菌噁唑与嘧霉胺复配的联合毒力等方面取得了如下结果:1.分别测定了灰霉病菌对啶菌噁唑的11个敏感菌系和3个抗性菌系对嘧霉胺、速克灵、多菌灵和苯醚甲环唑的敏感性。通过对不同药剂EC50值之间的线性回归分析得出,啶菌噁唑与这4种药剂的EC50值之间的相关系数分别是0.0069、0.0006、0.0007和0.0018,相关性很差,表明啶菌噁唑与这4种药剂之间不存在交互抗药性关系。2.建立了灰霉病菌对啶菌噁唑的敏感性基线。将河北省保定、廊坊、承德、衡水4地从未使用过啶菌噁唑的保护地中黄瓜和番茄病果或病叶菌样进行单孢分离。采用菌丝生长速率法对102株灰霉病菌单孢菌株进行敏感性测定,其EC50值分布在0.0460～0.1991μg/mL,平均EC50值为(0.1182±0.0363)μg/mL,不同敏感性的菌株频率呈连续的单峰曲线分布,没有出现敏感性下降的亚群体,可把102株灰霉菌株的EC50平均值(0.1182±0.0363)μg/mL作为灰霉病菌对啶菌噁唑的敏感性基线。3.经紫外光诱导,获得7个抗啶菌噁唑突变菌株。研究发现,抗药突变体的菌落直径、菌丝产量、产孢量、菌核数及致病力均显著低于其亲本菌株。抗药突变体的抗药水平随着在无药PDA培养基上培养代数的增加抗药水平降低。因此推测,灰霉病菌对啶菌噁唑存在着较低或中等抗性风险。4.测定灰霉病菌抗啶菌噁唑突变体及其亲本菌株的菌丝块的电导率,发现抗啶菌噁唑突变体的渗透性显著高于其亲本菌株。此外还发现抗啶菌噁唑突变体在高浓度的葡萄糖和高浓度的NaCl培养基上表现极为敏感。为灰霉病菌对啶菌噁唑的抗药机制提供参考。5.以菌丝生长速率法测定啶菌噁唑与嘧霉胺52个配比的混合物的联合毒力,发现以1:9混配时增效系数(SR值)最大。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 1 灰霉病的病原及症状识别
• 2 灰霉病的发生条件
• 3 灰霉病菌的寄主
• 4 灰霉病的危害
• 5 灰霉病的防治方法
• 5.1 物理防治
• 5.2 农业防治
• 5.3 生态防治
• 5.4 生物防治
• 5.5 化学防治
• 6 抗性机制研究
• 6.1 苯并咪唑类杀菌剂的作用机制
• 6.2 二甲酰亚胺类杀菌剂的作用机制
• 6.3 N-苯基氨基甲酸酯类杀菌剂作用机制
• 6.4 苯胺基嘧啶类杀菌剂的作用机制
• 7 抗药性风险评估
• 8 抗药性治理
• 9 新型杀菌剂啶菌噁唑的性质特点及应用现状
• 第一章 灰霉病菌对啶菌噁唑的敏感性检测及交互抗性
• 1 材料方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 灰霉病菌对啶菌噁唑敏感性测定方法的确定
• 2.2 灰霉病菌对啶菌噁唑的敏感性
• 2.3 灰霉病菌对不同作用机制杀菌剂的敏感性
• 2.4 啶菌噁唑与不同作用机制杀菌剂的交互抗性
• 3 讨论
• 第二章 灰霉病菌对啶菌噁唑的抗药性风险评估
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 灰霉病菌对啶菌噁唑的敏感性基线的建立
• 2.2 紫外线诱导时间优化
• 2.3 抗药突变体的获得
• 2.4 菌落直径、菌丝干重和产孢量比较
• 2.5 菌核数比较
• 2.6 致病性比较
• 2.7 抗性遗传稳定性的测定
• 3 讨论
• 第三章 灰霉抗感啶菌噁唑菌株的生理生化性状比较
• 1 材料方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 供试仪器设备
• 1.3 供试试剂
• 1.4 电导率的比较
• 1.5 不同NaCl 剂量下渗透性比较
• 1.6 不同浓度葡萄糖上渗透性比较
• 1.7 不同温度下对渗透压的敏感性
• 2 结果与分析
• 2.1 电导率的比较
• 2.2 不同NaCl 剂量下渗透性比较
• 2.3 不同葡萄糖浓度上渗透性比较
• 2.4 不同温度下对渗透压的敏感性
• 3 讨论
• 第四章 啶菌噁唑与嘧霉胺复配对灰霉病菌的联合作用
• 1 材料方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 供试药剂
• 1.3 杀菌剂对灰霉病菌的毒力测定
• 1.4 杀菌剂复配效果测定
• 1.5 增效系数的计算
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 第五章 全文总结
• 参考文献
• 在读期间发表的论文
• 作者简介
• 致谢