论文摘要
烟草青枯病是由茄科罗尔氏菌(Ralstonia solanacearum E. F Smith)引起的细菌性土传病害,其分布广、危害严重。它不仅危害烟草,而且还危害许多茄科作物,迄今还没有一种有效的药剂防治它。因此发掘有效的生防菌来防治该病,具有重要的现实意义。本研究采用抑菌圈-定殖力双重测定法,筛选出FT12、F08、Y05三个对青枯菌抑菌作用较强的菌株。抑菌谱测定表明,三个菌株有较宽的抑菌谱。依据三个菌株的形态学、生物学和生理生化特性对它们进行分类鉴定,初步确定FT12为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),F08、Y05为侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus)。此外,三个菌株有很强的定殖能力。在温室防病试验中,其平均防病效果分别达70.21%(FT12)、70.70%(F08)和60.69%(Y05)。用双抗标记法测定了3株生防菌,内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B001、内生短短芽孢杆菌(Bacillus brevis) B011和根围侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus) 2-Q-9,在烟株根茎叶及根表土壤中的定殖和消长动态。结果表明,3株生防菌具有很强的定殖能力,其中以B011的定殖能力最强。平板拮抗试验表明,3株生防菌相互间无拮抗作用,且混合菌群的抑菌活性有所增强。生防菌B001、B011和2-Q-9以不同组合混合接种烟株后,生防菌两两混接总体上可提升其定殖力,但3株混接对B011和2-Q-9有抑制作用;在烟株接种移栽后的第60d,各混接组合的定殖总量均达到最大,其中B001+B011和B011+2-Q-9组合的定殖总量分别达7.28、7.231g-cfu/g,远高于其它处理。将生防菌B001、B011和2-Q-9浸根,灌根,注射,拌饼肥的生物防治法与喷雾农用链霉素的化学防治法相结合,筛选出了对青枯病防效较好的防治组合。其中,联合处理的防治效果均优于72%农用链霉素单独处理。拌饼肥联合处理要好于对应的不拌饼肥处理,注射法联合处理好于对应的非注射法处理;根围生防菌2-Q-9与农用链霉素联合处理优于对应的单用2-Q-9处理,但链霉素与两株内生菌B001、B011的联合处理却对2株生防菌产生抑制作用。同时,筛选出的内生生防菌拌饼肥-灌根-注射联合处理的施用组合,其防效分别达51.37%(B001),71.20%(B011);2-Q-9的菌饼肥-菌灌根-喷雾Agr-SM组合,其防效可达62.32%。将3株生防菌B001、B011和2-Q-9混合接种,表明多功能菌群协同防治烟草青枯病具有有效性和可行性。生防菌B001、B011和2-Q-9的不同组合混接烟株后,其防治效果均优于72%的农用链霉素单独处理;两菌混接要优于对应的单菌处理,其中以B011+2-Q-9组合防效最好,达83.39%,其次是B001+B011组合,防效为78.34%;但三株混接的防效仅为45.49%,低于所有生防处理。