酵母葡聚糖的研制

论文摘要

本论文在现有酵母葡聚糖两种提取工艺的基础上,提出了高压—碱法提取工艺,对提取条件进行了优化、对提取物特性进行了分析。对甲酸水解制备酵母水溶性葡聚糖的工艺进行了优化,对其生物活性做了初步研究。采用碱法、高压法和高压—碱法三种不同工艺提取酵母葡聚糖,通过对提取物的得率、蛋白质、多糖、脂类、灰分含量等进行分析,表明高压—碱法去除蛋白质效果好且多糖含量高;研究了丙酮干燥法、无水乙醇干燥法和真空冷冻干燥法对产品品质的影响,结果表明丙酮干燥法效果最好。对酵母葡聚糖含量的测定方法进行研究。分别比较H2SO4和TFA在不同条件下水解酵母不溶性葡聚糖对测定结果的影响,实验表明,采用H2SO4进行水解优于TFA,最佳水解条件为:H2SO4浓度2.7mol/L、水解温度100℃、时间3h。通过L9（34）正交实验对高压—碱法提取工艺进行了优化。适宜的提取工艺条件为:碱处理浓度6%,压力0.1MPa,时间30min,酵母葡聚糖提取率为23.30%,提取物中多糖含量为91.85%。经红外光谱与纸层析分析结果表明:产品只含葡萄糖一种单糖,糖苷键为β型。酵母葡聚糖的水不溶性制约了其在制药工业的应用。选择甲酸水解的方法制备酵母水溶性葡聚糖,采用L9（34）正交设计对水解条件进行了优化,适宜的条件为:温度为80℃,时间为1.5h,甲酸用量为1:10（w/v）,甲酸浓度90%。酵母水溶性葡聚糖得率为80.15%,经红外光谱分析结果表明:水解前后产品结构未发生改变。研究了酵母水溶性葡聚糖对各种供试菌的抑菌作用。结果表明,酵母水溶性葡聚糖对细菌的抑制效果明显,对酵母菌、霉菌无抑菌效果;最小抑菌浓度分别为:大肠杆菌75mg/mL,鸡沙门氏菌37.5mg/mL,枯草芽孢杆菌37.5mg/mL,金黄色葡萄球菌37.5mg/mL。酵母水溶性葡聚糖最适抑菌pH范围为6.0～7.0,热稳定性良好。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 多糖的研究进展
• 1.2 酵母葡聚糖研究概况
• 1.3 酵母葡聚糖的应用
• 1.4 本课题的立题依据及研究内容
• 2 材料与方法
• 2.1 材料和仪器
• 2.1.1 原料
• 2.1.2 菌种
• 2.1.3 培养基
• 2.1.4 主要药品
• 2.1.5 实验仪器
• 2.1.6 主要溶液
• 2.2 分析方法
• 2.2.1 多糖含量的测定
• 2.2.2 多糖提取率计算
• 2.2.3 水分含量的测定
• 2.2.4 蛋白质含量的测定
• 2.2.5 灰分含量的测定
• 2.2.6 脂类含量的测定
• 2.2.7 还原糖测定
• 2.2.8 酵母水溶性葡聚糖得率计算
• 2.2.9 多糖组分的测定
• 2.2.10 红外光谱分析
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 酵母葡聚糖测定条件优化
• 2.3.2 酵母葡聚糖提取工艺
• 2.3.3 酵母葡聚糖提取工艺条件的优化
• 2.3.4 酵母葡聚糖性质和结构分析
• 2.3.5 酵母水溶性葡聚糖的制备
• 2.3.6 酵母水溶性葡聚糖的抑菌活性试验
• 3 结果与讨论
• 3.1 酵母葡聚糖测定条件优化
• 3.1.1 水解温度对酵母葡聚糖测定结果的影响
• 3.1.2 酸浓度对酵母葡聚糖测定结果的影响
• 3.1.3 水解时间对酵母葡聚糖测定结果的影响
• 3.1.4 正交实验
• 3.1.5 不同酸处理方法的比较
• 3.1.6 小结
• 3.2 酵母葡聚糖提取工艺的优化
• 3.2.1 不同提取工艺产物多糖含量
• 3.2.2 不同提取工艺产物蛋白质含量
• 3.2.3 不同提取工艺产物灰分含量
• 3.2.4 不同提取工艺产物提取率
• 3.2.5 不同提取工艺产物脂类含量
• 3.2.6 不同提取工艺产物多糖组分的测定
• 3.2.7 不同提取工艺产物红外光谱分析结果
• 3.2.8 小结
• 3.3 高压-碱法提取工艺条件的优化
• 3.3.1 单因素实验
• 3.3.2 正交实验
• 3.3.3 干燥方式的比较
• 3.3.4 酵母葡聚糖性质和结构分析
• 3.3.5 小结
• 3.4 酵母水溶性葡聚糖的制备
• 3.4.1 酵母水溶性葡聚糖制备条件优化
• 3.4.2 酵母水溶性葡聚糖的性质和结构分析
• 3.5 酵母水溶性葡聚糖的抑菌活性实验
• 3.5.1 酵母水溶性葡聚糖抑菌效果测定
• 3.5.2 最低抑菌浓度（MIC）的测定
• 3.5.3 pH对抑菌活性的影响
• 3.5.4 温度对抑菌活性的影响
• 3.5.5 小结
• 4 结论
• 5 展望
• 6 参考文献
• 7 论文发表情况
• 8 致谢