论文摘要
菜芙蓉的花、茎、叶、种子中,都含有丰富的生物活性物质,本文主要对菜芙蓉种子、花以及茎中黄酮提取方法进行了研究并开发出了两种荧光分析方法和一种高效液相色谱分析方法,从而对菜芙蓉中黄酮的单体芦丁和槲皮素的含量进行了检测。本文主要以菜芙蓉的种子、花、茎为原料,采用传统的乙醇浸提法,提取菜芙蓉中的总黄酮;并以芦丁为对照品制作标准曲线,运用硝酸铝比色法测定总黄酮的含量。通过单因素试验方法,确定乙醇浓度、浸提时间、浸提温度、液料比四种因素的提取条件;根据二次回归正交旋转组合设计原理,在单因素试验的基础上采用四因素五水平的响应曲面分析方法进行试验设计;同时通过响应曲面的回归分析方法,将因子(乙醇浓度、浸提时间、浸提温度、液料比)与响应值(提取率)的相互关系用多项式拟合,把因子和响应值的关系函数化,通过对函数的面进行分析,研究因子与响应值之间、因子与因子之间的相互关系,并进行优化,从而获得最优的工艺参数,提高了菜芙蓉样品中黄酮的提取率。最终利用模型的响应曲面图及其等高线图,得到的优化工艺参数为:乙醇浓度为53.9%、浸提时间为2.2h、浸提温度为76.9℃、液料比为22.3mL·g-1时提取效果最佳,黄酮提取率高达3.6%。鉴于植物体内含有丰富的芦丁和槲皮素物质,尤其这两种化合物在生物、医学领域的广泛运用,本文根据芦丁和槲皮素中特有的烯醇式的羟基或羧基结构能与金属离子形成π键共扼体系,形成具有灵敏度高、检测限低的具有很强的荧光性化合物的性质,分别研究了芦丁-铁氰化钾-硼砂体系和槲皮素-Al3+体系荧光光度法进行测定菜芙蓉中的芦丁或槲皮素的含量,分析各体系的荧光性质及影响因素,通过各体系的精密度和回收率试验,开发了关于菜芙蓉中的芦丁和槲皮素的荧光检测技术。为了进一步更准确地进行定性定量分析菜芙蓉中黄酮类物质,本文最后研究并开发了以芦丁和槲皮素为标准物,采用C18反相色谱柱,二极管阵列检测器高效液相色谱法分离分析菜芙蓉中的芦丁和槲皮素的色谱分析方法,检测结果进一步说明菜芙蓉中确实含有丰富的黄酮类物质,该资源值得开发和推广。