高效液相色谱在中草药质量控制中的应用

论文摘要

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）是在经典液相色谱法和气相色谱法的基础上发展起来的新型分离分析技术。鉴于其简便、快速、灵敏、准确的特点,至今,已在生物工程、制药工业、食品工业、环境监测、石油化工等领域获得广泛的应用。本文建立了用反相高效液相色谱法研究中药连翘、柿叶和峨嵋野连中有效成分的含量测定新方法,并建立了高良姜和石韦药材的高效液相指纹图谱。论文由综述和研究报告两部分组成,综述部分简单概述了高效液相色谱的特点、色谱技术方面的进展、在中草药有效成分分析中的应用以及中药指纹图谱质控技术。研究报告部分建立了中药连翘、柿叶和峨嵋野生黄连中几种有效成分的含量测定及高良姜和石韦药材的高效液相色谱指纹图谱的建立,包括:反相高效液相色谱法同时测定连翘和柿叶中的3种黄酮和2种三萜酸、反相高效液相色谱法同时测定峨嵋野生黄连中不同部位的3种生物碱以及高良姜和石韦药材的高效液相指纹图谱研究。1.高效液相色谱法同时测定柿叶和连翘中黄酮和三萜类化合物的含量建立了一种同时测定黄酮类和三萜类化合物的反相高效液相色谱法。采用EclipseXDB-C18（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇-乙腈-0.05%磷酸（三乙胺调pH 3.0）为流动相,采用梯度洗脱,柱温为30℃,0-10 min流速为1.0 mL/min,10-12 min流速线性变化至0.5 mL/min,12 min后流速恒定为0.5 mL/min,检测波长采用波长程序。芦丁、金丝桃苷、槲皮素、齐墩果酸和熊果酸的线性范围分别为1.632-489.6、1.045-522.5、1.349-134.9、5.290-529.0、5.075-507.5 mg/L,相关系数均大于0.999。检测限分别为0.096、0.196、0.043、0.639、0.733 mg/L。该方法灵敏快速,结果可靠,重现性好,可用于柿叶和连翘中黄酮和三萜类化合物的分离测定。2.峨嵋野生黄连不同部位三种生物碱的含量测定建立一反相高效液相色谱法同时测定峨嵋野生黄连不同部位盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量。采用ZORBAX Eclipse XDB-C8柱（150×4.6 mm;5μm）,以乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾水溶液（磷酸调pH 3.0）（25:75）为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为342 nm,外标法定量。盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的线性范围分别为0.0256-160、0.0147-92.0、0.0371-116μg/mL。相关系数均为0.9999。检测限分别为0.010、0.009、0.005μg/mL。该方法灵敏快速,线性范围宽,重现性好,用于峨嵋野生黄连中三种生物碱的含量测定结果可靠。3.高良姜药材高效液相指纹图谱研究建立了高良姜HPLC指纹图谱分析方法。采用Eclipse XDB-C18（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水（冰乙酸调pH 3.0）,梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,检测波长254 nm。确定了12个不同产地高良姜药材乙醇提取部分13个共有峰,各产地药材指纹图谱与对照指纹图谱相似度均大于0.9,可以用来作定性研究。该方法准确,重复性好,为科学评价及有效控制其质量提供参考。4.石韦药材高效液相指纹图谱研究用正交设计优化石韦的超声提取条件,并建立了石韦高效液相指纹图谱分析方法。采用Eclipse XDB-C18（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水（冰乙酸调pH 3.0）,梯度洗脱,流速:0.8 mL/min,柱温:35℃,检测波长采用波长程序。确定了8批不同产地石韦药材乙醇提取部分22个共有峰,各产地药材指纹图谱与对照指纹图谱相似度均大于0.9,可以用来作定性研究。该色谱指纹图谱分析法简便,能快速地鉴别和区分不同来源的石韦药材,为科学评价及有效控制其质量提供依据。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 高效液相色谱概述
• 1.2 色谱技术在中草药应用方面的进展
• 1.3 HPLC在中草药有效成分含量测定中应用
• 1.4 中药材指纹图谱质控技术
• 1.5 展望
• 第二章 高效液相色谱法同时测定柿叶和连翘中黄酮和三萜类化合物的含量
• 2.1 实验部分
• 2.2 结果与讨论
• 2.3 结论
• 第三章 峨嵋野生黄连不同部位三种生物碱的含量测定
• 3.1 仪器与试药
• 3.2 方法和结果
• 3.3 讨论
• 第四章 高良姜药材高效液相指纹图谱研究
• 4.1 实验部分
• 4.2 结果与讨论
• 4.3 结论
• 第五章 石韦高效液相指纹图谱研究
• 5.1 实验部分
• 5.2 结果与讨论
• 5.3 结论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 附录:硕士期间发表的论文
• 致谢