本文主要研究内容
作者陈宗超（2019）在《GldM蛋白在鸭疫里默氏杆菌致病过程中的作用机制》一文中研究指出：鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌(Riemrella anatipestifer,RA)引起的一种主要侵害雏鸭、雏火鸡、鹅等多种禽类的急性或慢性、败血性、接触性传染病。感染鸭发病率高达90%、死亡率高达75%,对世界养鸭业造成重大经济损失。RA属于拟杆菌门,黄杆菌属,无鞭毛和菌毛,而拟杆菌门有多种菌都存在滑行运动的现象。基因分析发现RA同样存在着滑行运动基因,同时还存在一整套的新型分泌系统即IX型分泌系统(the type IX secretion system,T9SS)基因,该系统在拟杆菌门中普遍存在且高度保守。在前期研究中我们用转座子随机突变技术筛选到一株Yb2AS87_RS08465基因突变株,发现其毒力显著减弱,但具体的机制并不清楚。基因比对分析发现AS87_RS08465编码细菌滑行运动和IX型分泌系统核心组分蛋白GldM。通过Western blot鉴定到该蛋白位于RA的细胞膜上。琼脂糖凝胶扩散试验证实了野生株Yb2存在着滑行运动,而突变株的滑行运动能力丧失。进一步的研究表明突变株RA2281(又称Yb2ΔgldM)的黏附和入侵细胞的能力显著降低,此外,突变株Yb2ΔgldM感染雏鸭的血液载菌量显著低于相同剂量野生株感染雏鸭的载菌量,表明AS87_RS08465基因对RA感染雏鸭的致病性至关重要。经转录组测序发现,突变株Yb2ΔgldM有15个基因上调表达,其中有6个上调表达倍数在2倍以上、下调表达基因15个,其中有5个下调2倍以上,且部分基因也是IX型分泌系统的组分,提示这些成分之间存在着功能上的联系。本研究表明GldM蛋白与RA滑行运动有关,且对RA感染鸭的致病性有着关键作用。提取野生株Yb2、突变株Yb2ΔgldM和回复株cYb2ΔgldM的分泌蛋白,SDS-PAGE分析发现突变株Yb2ΔgldM在分泌蛋白的丰度和含量上较Yb2和回复株cYb2ΔgldM有很大的区别,Yb2ΔgldM分泌蛋白的酶活试验也证实其酶降解能力显著降低,表明突变株缺失了分泌某些关键酶分子的能力。质谱分析结果显示Yb2ΔgldM的分泌蛋白与Yb2相比,具有显著性的差异,这些差异蛋白有9个含有特异性CTD结构,是IX型分泌系统的分泌底物。基因功能注释显示这9个蛋白很多都是具有催化活性的酶类,可能是RA重要的潜在毒力因子。本研究证明了GldM蛋白与RA的滑行运动、IX型分泌系统及蛋白分泌有关。
Abstract
ya yi li mo shi gan jun bing shi you ya yi li mo shi gan jun (Riemrella anatipestifer,RA)yin qi de yi chong zhu yao qin hai chu ya 、chu huo ji 、e deng duo chong qin lei de ji xing huo man xing 、bai xie xing 、jie chu xing chuan ran bing 。gan ran ya fa bing lv gao da 90%、si wang lv gao da 75%,dui shi jie yang ya ye zao cheng chong da jing ji sun shi 。RAshu yu ni gan jun men ,huang gan jun shu ,mo bian mao he jun mao ,er ni gan jun men you duo chong jun dou cun zai hua hang yun dong de xian xiang 。ji yin fen xi fa xian RAtong yang cun zai zhao hua hang yun dong ji yin ,tong shi hai cun zai yi zheng tao de xin xing fen bi ji tong ji IXxing fen bi ji tong (the type IX secretion system,T9SS)ji yin ,gai ji tong zai ni gan jun men zhong pu bian cun zai ju gao du bao shou 。zai qian ji yan jiu zhong wo men yong zhuai zuo zi sui ji tu bian ji shu shai shua dao yi zhu Yb2AS87_RS08465ji yin tu bian zhu ,fa xian ji du li xian zhe jian ruo ,dan ju ti de ji zhi bing bu qing chu 。ji yin bi dui fen xi fa xian AS87_RS08465bian ma xi jun hua hang yun dong he IXxing fen bi ji tong he xin zu fen dan bai GldM。tong guo Western blotjian ding dao gai dan bai wei yu RAde xi bao mo shang 。qiong zhi tang ning jiao kuo san shi yan zheng shi le ye sheng zhu Yb2cun zai zhao hua hang yun dong ,er tu bian zhu de hua hang yun dong neng li sang shi 。jin yi bu de yan jiu biao ming tu bian zhu RA2281(you chen Yb2ΔgldM)de nian fu he ru qin xi bao de neng li xian zhe jiang di ,ci wai ,tu bian zhu Yb2ΔgldMgan ran chu ya de xie ye zai jun liang xian zhe di yu xiang tong ji liang ye sheng zhu gan ran chu ya de zai jun liang ,biao ming AS87_RS08465ji yin dui RAgan ran chu ya de zhi bing xing zhi guan chong yao 。jing zhuai lu zu ce xu fa xian ,tu bian zhu Yb2ΔgldMyou 15ge ji yin shang diao biao da ,ji zhong you 6ge shang diao biao da bei shu zai 2bei yi shang 、xia diao biao da ji yin 15ge ,ji zhong you 5ge xia diao 2bei yi shang ,ju bu fen ji yin ye shi IXxing fen bi ji tong de zu fen ,di shi zhe xie cheng fen zhi jian cun zai zhao gong neng shang de lian ji 。ben yan jiu biao ming GldMdan bai yu RAhua hang yun dong you guan ,ju dui RAgan ran ya de zhi bing xing you zhao guan jian zuo yong 。di qu ye sheng zhu Yb2、tu bian zhu Yb2ΔgldMhe hui fu zhu cYb2ΔgldMde fen bi dan bai ,SDS-PAGEfen xi fa xian tu bian zhu Yb2ΔgldMzai fen bi dan bai de feng du he han liang shang jiao Yb2he hui fu zhu cYb2ΔgldMyou hen da de ou bie ,Yb2ΔgldMfen bi dan bai de mei huo shi yan ye zheng shi ji mei jiang jie neng li xian zhe jiang di ,biao ming tu bian zhu que shi le fen bi mou xie guan jian mei fen zi de neng li 。zhi pu fen xi jie guo xian shi Yb2ΔgldMde fen bi dan bai yu Yb2xiang bi ,ju you xian zhe xing de cha yi ,zhe xie cha yi dan bai you 9ge han you te yi xing CTDjie gou ,shi IXxing fen bi ji tong de fen bi de wu 。ji yin gong neng zhu shi xian shi zhe 9ge dan bai hen duo dou shi ju you cui hua huo xing de mei lei ,ke neng shi RAchong yao de qian zai du li yin zi 。ben yan jiu zheng ming le GldMdan bai yu RAde hua hang yun dong 、IXxing fen bi ji tong ji dan bai fen bi you guan 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学院的陈宗超，发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文，是一篇关于鸭疫里默氏杆菌论文,型分泌系统论文,毒力论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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