大鼠脑外伤后BDNF的表达及死后稳定性的实验研究

论文摘要

研究背景及目的:外伤性脑损伤（traumatic brain injury TBI）在交通事故和其他机械性损伤最为常见,如何利用比较客观的方法和标准推断损伤时间一直是法医学的一大难题,脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophical factor BDNF）是神经营养因子中的一种,在正常的脑组织中微量表达,在脑损伤时表达增强,不仅具有神经元保护作用,还可以促进神经细胞的分化和再生,对大脑损伤后脑功能的恢复起重要作用,目前国内外对BDNF的研究多侧重于其对神经损伤的治疗作用,对于内源性BDNF在脑外伤后的不同时间的表达的强弱及死后稳定性的研究甚少。脑外伤（brain injury BI）后,进一步研究BDNF在脑外伤后的含量变化与损伤时间是否具有相关性,及其死后稳定性,有可能为法医学上颅脑外伤时间的推断,颅脑损伤的鉴定及生前伤和死后伤的鉴别提供一种新的指标。方法:SD大鼠105只,体重（270±30）g,雌雄不限,随机分为正常组,假手术组,和脑外伤组。实验参照Feeney’S自由落体模型装置并制作大鼠脑挫裂伤模型;在脑挫裂伤后不同时间点取损伤周围脑组织;对其取材脑组织石蜡切片进行HE染色光镜观察;采用免疫组织化学染色法进行BDNF染色;用SPSS 10.0 for Windows统计学软件包对所得数据进行统计学分析。结果:正常组、假手术组呈阴性和或弱阳性表达,外伤性脑损伤组伤后0.5小时后即出现阳性表达,此后表达逐渐增强,至6小时呈强阳性表达,后逐渐降低,24小时后基本降至正常,48小时组与24小时组BDNF表达变化不大。死后稳定性各亚组表达情况与伤后6小时组相似,脑损伤组标本在-20℃环境中,BDNF阳性表达在1-7天内变化不明显。结论:外伤性脑损伤后BDNF可迅速增量表达,与时间相关,呈一定的规律性,可能对急性脑损伤有一定的保护作用。且BDNF的表达具有较强的死后稳定性,可作为24小时以内的颅脑损伤时间推断的一个参考指标。结论:外伤性脑损伤后BDNF可迅速增量表达,与时间相关,呈一定的规律性,且BDNF的表达具有较强的死后稳定性,可作为24小时以内的颅脑损伤时间推断的一个参考指标。

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论文正文：大鼠脑外伤后BDNF 的表达及死后稳定性的实验研究

前言

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 主要仪器

1.3 主要试剂

1.4 实验方法

1.4.1 脑外伤模型的建立

1.4.2 标本处理

1.4.3 HE 染色

1.4.4 免疫组织化学染色

1.4.5 显微镜观察

1.4.6 免疫组化染色结果判定标准

1.5 图像分析

1.6 统计学处理

2 结果

2.1 肉眼观察

2.2 光镜下脑组织HE 染色显示

2.3 免疫组织化学染色

2.4 免疫组织化学染色图像分析与处理

3 讨论

全文总结

参考文献

附图

文献综述

致谢

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