胃癌患者p53基因及K-ras基因的突变研究

论文摘要

目的:检测抑瘤基因p53及原癌基因K-ras在中国湖南人群胃癌患者和正常人群中的突变情况,分析抑瘤基因p53和原癌基因K-ras基因突变对湖南人群胃癌发生的影响。方法:应用病例-对照分析研究（对照组129例,胃癌病例组123例）,抽提外周血基因组DNA,采用聚合酶链式反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）分析法结合银染技术及测序检测胃癌患者p53基因及K-ras基因突变情况。结果:湖南地区胃癌患者中p53基因的突变率为29.3%,主要发生在外显子5区域,突变方式主要为G:C→A:T（15/36,41.7%）,突变位点呈分散型分布。p53基因的突变与患者性别、年龄、吸烟史及饮酒史等因素无关（P＞0.05）,与肿瘤的分化程度相关（P=0.006）;p53基因在有淋巴结转移的患者中突变率较高（42.3%）。K-ras基因突变率为9.76%,主要为第12位密码子的突变。突变类型以G→A的转换为主。Logistic单因素及多因素分析结果显示:K-ras基因的突变与患者性别、年龄、吸烟史和饮酒史、是否有淋巴结转移及肿瘤的分化程度等因素均无关（P＞0.05）。在本研究中发现两例p53基因和K-ras基因的共突变,统计学分析显示两种突变间无相关性（P＞0.05）。结论:中国湖南人群中,p53基因、K-ras基因的突变与胃癌密切相关。两个基因的突变不存在相关性。胃癌中p53基因的突变可能预示着肿瘤分化程度较高并且可能会促进胃癌的淋巴结转移。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 试验材料与试剂
• 1.1.1 样本的收集和处理
• 1.1.2 主要仪器设备
• 1.1.3 主要试剂
• 1.1.4 PCR引物设计和合成
• 1.2 方法
• 1.2.1 基因组DNA提取
• 1.2.2 测定基因组DNA的纯度和浓度
• 1.2.3 聚合酶链反应-单链构象多态性分析
• 1.2.4 测序
• 1.2.5 统计学分析方法
• 第二章 结果
• 2.1 研究对象的均衡性比较
• 2.2 基因组DNA的提取及浓度测定
• 2.3 p53、K-ras基因扩增结果及分析
• 2.3.1 p53基因扩增结果及分析
• 2.3.2 K-ras基因扩增结果及分析
• 2.4 SSCP分析结果
• 2.5 测序结果
• 2.5.1 p53基因PCR产物测序结果
• 2.5.2 K-ras基因PCR产物测序结果
• 2.5.3 p53基因突变分析结果
• 2.5.4 K-ras基因突变分析结果
• 2.6 统计学分析
• 2.6.1 p53基因突变统计学分析结果
• 2.6.2 K-ras基因突变统计学分析结果
• 第三章 讨论
• 3.1 基因组DNA的提取
• 3.2 聚合酶链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP）
• 3.3 p53、K-ras基因与胃癌
• 第四章 结论
• 参考文献
• 综述 肿瘤相关基因与胃癌
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文