论文摘要
研究背景与目的:原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,我国每年约有23万人死于肝癌,而且近几年肝癌的发病率有上升趋势。虽然近年来肝癌的早期检测水平和治疗技术有了很大的提高,但肝癌患者的生存率并没有多大改观,其中病因不明是主要的原因之一,而转移和复发业已成为进一步提高肝癌生存率的一个瓶颈,也成为攻克癌症最重要的难关之一。目前公认与肝癌发生有关的原因有肝硬化、病毒性肝炎、酒精、肥胖[1]、糖尿病、非酒精性脂肪肝、黄曲霉素等化学致癌物质及环境因素。近年来有人提出其分子学发病机制,认为肝癌的发生是一个多步骤多因素过程,肝脏的慢性损伤、免疫应答、DNA氧化的损害都可能导致基因突变,致癌基因的激活、抑癌基因的失活,最终导致肝癌的发生[2]。组蛋白脱乙酰化酶6 （histone deacetylase 6 HDAC6）是新近发现的微管相关蛋白及热休克蛋白90（heat-shock protein 90 HSP90）相关蛋白。HDAC6作为组蛋白脱乙酰化酶家族一员通过微管去乙酰化和HSP90的去乙酰化调控基因转录,改变细胞的运动能力从而参与肿瘤发生发展和肿瘤的转移以及肿瘤血管的生成。那么HDAC6究竟在肝癌组织中表达情况如何?与哪些因素有关?目前尚无报道。本课题从基因及蛋白质两方面检测HDAC6在肝癌组织中的表达并探讨其与肝癌发生发展过程中相关的临床病理因素间的相关性,从而期望能够发现肝癌发病及发展和转移新的因素,为肝癌临床治疗提供理论依据。研究方法:1.应用激光捕获显微切割术（LCM）联合逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测36例行根治性切除的原发性肝细胞癌中心处非坏死癌组织及24例正常肝组织的HDAC6 mRNA在组织中的表达,并对HDAC6与肝癌发生发展过程中相关的临床病理因素间相关性进行研究。2.应用免疫组织化学方法检测HDAC6在肝癌组织中的表达,并对HDAC6与肝癌发生发展过程中相关的临床病理因素间相关性进行研究。结果:1.应用激光俘获显微切割联合RT-PCR检测结果显示:肝癌组织中HDAC6mRNA表达水平为0.82±0.04,正常肝组织为0.63±0.06。t检验统计分析结果显示二者间差异有统计学意义（t=15.81,p<0.05）,肝癌组织HDAC6 mRNA表达水平明显高于正常肝组织。应用免疫组织化学检测结果显示:在免疫组织化学染色中,36例肝癌组织中,有27例表达强阳性（见照片）,9例表达阳性。而在正常肝组织中,3例呈强阳性表达,20例呈现阳性表达,1例为阴性表达。可以看出,肝癌组织HDAC6的表达强阳性率明显高于正常肝组织。进行χ2检验,χ2 =25.83;P<0.05,其差异具有统计学意义。2.应用激光俘获显微切割联合RT-PCR检测结果中,在HADC6与肝癌各临床病理因素关系中发现,HDAC6与肿瘤AFP（alpha fetoprotein）的量、有无转移、有无包膜及肿瘤临床病理分级有一定相关性;无包膜的,有转移的,AFP≥400ng/ml的患者,HDAC6 mRNA表达量增高趋势; Edmonson病理分级中,3级患者HDAC6表达量高于1级和2级患者;而与有无伴有肝硬化（liver cirrhosis LC）、肿瘤大小、病灶个数等无明显相关性。应用免疫组织化学检测结果也与以上相一致。结论:1. HDAC6在肝癌组织中基因水平与蛋白质水平的表达增高,其表达水平与肝癌发生和进展有关。2. HDAC6在肝癌发生转移患者癌组织中表达增高。
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标签：原发性肝癌论文; 激光俘获显微切割论文; 组蛋白去乙酰化论文;