高效、低毒免疫毒素SM5-1-PE38KDEL（突变体）的构建及其抗肿瘤作用机理的研究

论文题目: 高效、低毒免疫毒素SM5-1-PE38KDEL（突变体）的构建及其抗肿瘤作用机理的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 肿瘤学

作者: 宋水川

导师: 郭亚军,陈列平,王皓,戴建新,赵健

关键词: 免疫毒素,渗漏综合征,定点突变,内吞,真核延长因子

文献来源: 第二军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,术后复发率较高,更主要的是手术无法切除肉眼看不见的肿瘤组织,而放、化疗对造血和免疫系统均有严重的抑制作用,甚至导致机体免疫力进一步下降,使肿瘤广泛转移。肿瘤免疫治疗是继手术、放疗、化疗之后的第四种治疗模式,使肿瘤的彻底根治有了新的希望。 免疫毒素是由具有导向能力的分子和具有细胞毒性的分子组合而成的具有特异性杀伤能力的杂合分子。这种以特异性单抗为“载体”、以毒素为“弹头”组成的杂合分子又称为“生物导弹”,但是在相当长的一段时间内内,免疫毒素治疗效果并未达到令人满意的程度。这其中主要有两个原因,一是毒素所致的严重副反应;二是缺乏高度特异性的肿瘤单克隆抗体。因而,寻找肿瘤特异性抗体和改善毒素的毒副作用,并进而探讨对肝癌有效的治疗已成为目前临床的迫切需求。 绿脓杆菌外毒素(PE),是66kD的单链蛋白,氨基末端构成Ⅰa区,为细胞结合结构区域。第253-364氨基酸组成Ⅱ区,负责毒素的转位。Ⅲ区,405-613,具有ADP核糖基化活性。PE的细胞毒机制是:在受体或抗体受体介导下内吞,在胞内蛋白水解酶的作用下Ⅰ、Ⅱ区被去除,Ⅲ区转移入内质网,再转移至胞质,在那罩PE的DⅢ能使肽链延长因子2的ADP核糖基化,不能与核蛋白体相互作用,肽链不能延长,从而阻碍蛋白质的合成,导致真核细胞的死亡。尽管免疫毒素采用了PE衍生物的形式,大大减少了非特异结合,但仍存在着对正常细胞的剂量依赖的非特异或特异的损害,特别是对血管内皮细胞有明显的损害,造成血管渗漏综合症(Vascular Leak Syndrome,VLS):血管通透性增加,液体渗出,大量蛋白质进入组织间隙,水肿,从而体重增加,低蛋白血症,并造成组织缺氧,多器官衰竭等,严重限制了临床应用。PE分子有三个区域与血管渗漏综合症有关:348-350、430-432及605-607。根据PE分子的晶体结构,这三个区域均位于PE分子的表面,与血管内皮细胞接触,引起渗漏综合症。因此,我们设想如果能对此三区域及其周边相邻的氨基酸进行突变,使PE失去与血管内皮细胞接触作用同时保留其细胞毒活性,那就能大大减少血管渗漏综合症的发生,使免疫毒素的临床应用成为可能。 SM5-1是本研究所自主筛选克隆的小鼠抗人单克隆抗体,其抗原p230特异

论文目录:

缩略词表

中文摘要

ABSTRACT

前言

第一部分 SM5-1单链抗体及其免疫毒素基因的克隆

1．实验材料

2．实验方法

3．实验结果

4．讨论

参考文献

第二部分 免疫毒素SM5-1-PE38KDEL突变体设计及构建

1．实验材料

2．实验方法

3．实验结果

4．讨论

参考文献

第三部分 免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及突变体表达纯化

1．实验材料

2．实验方法

3．实验结果

4．讨论

参考文献

第四部分 免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及突变体体外活性研究

1．实验材料

2．实验方法

3．实验结果

4．讨论

参考文献

第五部分 免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及其突变体体内毒性及抗肿瘤研究

1．实验材料

2．实验方法

3．实验结果

4．讨论

参考文献

第六部分 免疫毒素SM5-1-PE38KDEL的作用机理研究

1．实验材料

2．实验方法

3．实验结果

4．讨论

综述

致谢

发布时间: 2005-09-21

参考文献

• [1].抗人肝癌单链免疫毒素的构建及其导向作用的实验研究[D]. 胡川闽.第四军医大学1996
• [2].抗白介素-4受体单抗与眼镜蛇毒细胞毒素构建的免疫毒素靶向治疗胰腺癌的实验研究[D]. 王鸿程.福建医科大学2008
• [3].表达重组免疫毒素EphrinAl-PE38的人骨髓间充质干细胞靶向治疗胶质瘤的实验研究[D]. 孙新林.南方医科大学2012
• [4].肿瘤治疗型抗体药物的研发[D]. 唐喆伟.华东师范大学2013
• [5].基于Hep G2细胞膜表面HSP70的免疫应用研究[D]. 崔乃忠.大连理工大学2013
• [6].白喉毒素/人B细胞活化因子融合蛋白对人急性白血病BALL-1细胞杀伤作用实验性研究[D]. 高新谱.山东大学2012
• [7].人源抗鼻咽癌LMP-1胞外区抗体Fab免疫毒素的制备及抗鼻咽癌实验研究[D]. 陈仁杰.南京医科大学2010

相关论文

• [1].单链抗体介导的小干扰RNA选择性沉默小鼠调节性T细胞Foxp3基因表达及效应[D]. 危华锋.第二军医大学2008
• [2].基于FIt3L基因和Anti-CTLA4抗体的抗肿瘤免疫联合治疗的实验研究[D]. 卢洋.第二军医大学2001
• [3].抗CD3人源化抗体的制备及生物学特性研究[D]. 李博华.第二军医大学2002
• [4].SM5-1单克隆抗体的人源化及其体内外抗肿瘤作用研究[D]. 寇庚.第二军医大学2004
• [5].IL-1023-57-PE40免疫毒素的制备及细胞毒活性研究[D]. 彭其胜.吉林大学2005
• [6].抗HER2抗体/Flt3L双功能融合蛋白的抗肿瘤作用机理研究[D]. 侯盛.第二军医大学2005
• [7].表达嵌合T细胞受体的T淋巴细胞介导的肿瘤过继性免疫治疗作用机理研究[D]. 张瑞萍.第二军医大学2005
• [8].重组免疫毒素hIL-2-Luffin P1的构建、表达及生物学活性的实验研究[D]. 王儒鹏.第三军医大学2005
• [9].IL-18－PE38重组免疫毒素及其治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的研究[D]. 李虹.四川大学2004
• [10].重组免疫毒素EGF-Linker-TCS的制备及其靶向抗肿瘤效果的评价[D]. 李咏梅.第一军医大学2007

标签：免疫毒素论文;  渗漏综合征论文;  定点突变论文;  内吞论文;  真核延长因子论文;