应用组织芯片技术对基质金属蛋白酶7（MMP-7），基质金属蛋白酶9（MMP-9）与人结直肠癌腹腔转移的相关性研究

论文摘要

目的:研究基质金属蛋白酶7（MMP-7）,基质金属蛋白酶9（MMP-9）在人结直肠癌（colorectal carcinoma,CRC）中的表达情况,以探讨其在人结直肠癌腹腔转移中的相关作用,为其在人结直肠癌腹腔转移相关预测及监测诊断性研究以及抗人结直肠癌药物的治疗性研究提供理论基础,并初步探讨组织芯片免疫组织化学在人结直肠癌相关指标检测中的应用。人结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,尽管对其采取了以手术为主的综合性治疗,但因缺乏有效的早期诊断标准及抗转移治疗靶点,患者预后仍不佳。因此,深入研究控制人结直肠癌发生发展过程的关键基因的表达变化及其作用,将为其早期诊断预后判断和抗转移治疗提供理论依据。基质金属蛋白酶7（MMP-7）和金属蛋白酶9（MMP-9）对细胞外基质成分具有广泛的降解作用,与多数肿瘤的侵袭转移密切相关。但有关其协同表达及其意义的研究国外报道较少,国内还未见报道。组织芯片（tissue chip）又称组织微阵列（tissue microarrays, T MA）,是将数十至上千个小组织整齐地排放在一张载玻片上而制成的组织切片。1998年,Kononen等首次提出了组织芯片的概念,并制作了乳腺癌的组织微阵列,应用荧光原位杂交、免疫组织化学和mRNA原位杂交技术研究了6种基因及其表达产物的表达状态,不但发现这些指标与乳腺癌的预后密切相关,而且与大组织的检测结果完全一致。组织芯片的诞生为医学病理学提供了一种高通量、大样本以及快速的分子水平的分析工具。此以后,组织芯片技术得到了迅速发展。国内外发表的组织芯片技术相关报道已有近千篇。这样用同一套组织芯片即可迅速的对上百种生物分子标记（如抗原,DNA和RNA）进行分析、检测。因此组织芯片技术是建立疾病,特别是肿瘤的生物分子文库的强有力的工具。为此,本实验拟应用组织芯片技术,采用免疫组织化学方法对12例正常大肠黏膜,50例伴有腹腔转移腺癌组织,48例无腹腔转移腺癌组织的MMP-7,MMP-9的表达进行检测,旨在探讨MMP-7,MMP-9对大肠癌发生和腹腔转移的影响及其机制。方法:本实验分为三部分。1收集河北医科大学附属第四病院外二科2006-2007年住院病人98例CRC原发灶和12例正常大肠黏膜的石蜡标本,使用组织阵列仪（personaltis suear rayer）制作成组织芯片（也称组织微阵列,tissue microarray）共3块。2采用抗生物素蛋白一过氧化酶（SP）法,对组织芯片进行免疫组织化学染色,并评估MMP-7,MMP-9的表达情况。寻找与CRC腹腔转移密切相关肿瘤标记物。3用SPSS10.0统计软件包进行统计分析,以P<0.05为差异显著,P<0.01为差异非常显著。比较有腹腔转移腺癌与无腹腔转移腺癌之间MMP-7,MMP-9的表达差异。结果:1制备了组织芯片蜡块3块,每个蜡块可切片成70-100张组织芯片玻片,供免疫组织化学检测及今后研究使用。在制片、染色过程中组织芯片上有部分组织块出现移位或脱失,可供统计分析的有96例。2 MMP-7,MMP-9在伴有腹腔转移CRC的阳性表达率分别为68%和78%,明显高于与无腹腔转移CRC表达率39.5%和33.3% （P<0.01）结论:1采用石蜡标本制作组织芯片,结合免疫组织化学方法,可以大规模、快速、高效地检测MMP-7,MMP-9在CRC中表达。2有腹腔转移CRC中MMP-7,MMP-9的表达明显高于腹腔转移,提示高表达MMP-7,MMP-9的CRC更容易发生腹腔转移。

论文目录

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• 研究论文 应用组织芯片技术对基质金属蛋白酶7（MMP-7），基质金属蛋白酶9（MMP-9）与人结直肠癌腹腔转移的相关性研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 MMP 家族在大肠癌转移中的意义及研究进展
• 致谢
• 个人简历