论文摘要
一.背景与目的 在变应性鼻炎（Allergic rhinitis,AR）发病过程中,嗜酸性粒细胞（Eosinophils,EOS）浸润是一个重要特征。EOS的活化、移行、聚集、组织浸润、凋亡与Th2细胞产生的细胞因子白细胞介素-5（IL-5）、粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）等关系非常密切。有大量试验证实,雷公藤甲素（Triptolide,TP）有显著的免疫抑制作用和激素样作用,可有效抑制哮喘豚鼠EOS浸润,促进其凋亡,其促进EOS凋亡的机制尚不十分清楚,但认为胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平是决定EOS生存还是凋亡的关键。本试验旨在探讨TP是否可有效控制豚鼠AR症状,是否可显著减少AR豚鼠鼻粘膜中EOS浸润,促进其凋亡。如果TP可有效促进EOS凋亡,进一步探讨抑制IL-5 mRNA和GM-CSF mRNA的表达是否是TP促进EOS凋亡的机理之一,胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平是否与EOS凋亡有关,并与糖皮质激素作比较,为TP在AR临床治疗的应用前景提供实验依据。 二.材料与方法 60只健康豚鼠随机平均分为4组:卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）致敏组,TP处理组,地塞米松（Dexamethasone,DM）处理组和生理盐水（Sodium chioride,SC）组,参照Konno方法并予改良,用卵清蛋白按照基础致敏、强化致敏和激发三个阶段建立AR豚鼠模型,TP处理组、DM处理组和SC组分别用TP、DM和SC在强化致敏和激发前30分钟腹腔注射和鼻腔滴入。各组激发2小时后用10%水合氯醛0.2ml/100g腹腔注射麻醉,心脏放血法处死豚鼠。暴露气管,在甲状软骨上方向鼻咽方向作气管插管,用生理盐水缓慢灌洗,取得鼻腔灌洗液,用Percoll细胞分离液分离、提纯得到EOS并计数;分离鼻骨前皮肤,咬除鼻骨,游离取出双侧鼻腔呼吸区粘膜。粘膜标本和细胞均及时用4%多聚甲醛固定,分别制成石蜡切片和细胞涂片。对鼻粘膜和EOS分别行HE染色和
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