本文主要研究内容
作者应思琦,张娅,郭琴,杨阳,刘爽,张翀（2019）在《稳定表达大电导钙激活钾通道α亚基的细胞株构建及其排钾的分子机制研究》一文中研究指出：目的·构建稳定表达大电导钙激活钾通道(large conductance Ca2+-activated K+channel, MaxiK或BK)α亚基的HEK293细胞株,探讨BKα通道的排钾机制。方法·构建带Myc标签的BKα质粒,采用脂质体转染方法将BKα质粒转染至HEK293细胞系中,用药物G418筛选阳性单克隆细胞株,分别以Western blotting和细胞免疫荧光法检测BKα蛋白表达及定位。将稳定表达BKα蛋白的HEK293细胞系培养于玻片,形成单细胞层,分别给予5 mmol/L和100 mmol/L钾离子浓度的浴液,膜片钳单通道记录BKα的离子流。内向整流性钾通道Kir4.1的野生型和突变型（G77R、G130R、C140R和R297C）分别转染稳定转染BKα的HEK293细胞后提取膜蛋白,Western blotting检测BKα的表达情况。结果·转染后的HEK293细胞中挑选表达BKα通道的细胞株,细胞免疫荧光验证了BKα通道表达及其在细胞膜上表达。在给予100 mmol/L钾离子浓度浴液的情况下,BKα的通道开放频率（NPo）快速增加。Kir4.1的野生型和突变型分别转染稳定转染BKα的HEK293细胞后提取膜蛋白,Western blotting检测发现转染Kir4.1突变体质粒的HEK293细胞的BKα表达较野生型增加（P<0.05）。结论·成功地建立了稳定表达BKα的HEK293细胞株,BKα通道可以被高钾溶液激活;BKα通道的膜表达水平与Kir4.1通道功能状态有关,可能是由于突变的Kir4.1通道导致细胞去极化,从而激活BKα。
Abstract
mu de ·gou jian wen ding biao da da dian dao gai ji huo jia tong dao (large conductance Ca2+-activated K+channel, MaxiKhuo BK)αya ji de HEK293xi bao zhu ,tan tao BKαtong dao de pai jia ji zhi 。fang fa ·gou jian dai Mycbiao qian de BKαzhi li ,cai yong zhi zhi ti zhuai ran fang fa jiang BKαzhi li zhuai ran zhi HEK293xi bao ji zhong ,yong yao wu G418shai shua yang xing chan ke long xi bao zhu ,fen bie yi Western blottinghe xi bao mian yi ying guang fa jian ce BKαdan bai biao da ji ding wei 。jiang wen ding biao da BKαdan bai de HEK293xi bao ji pei yang yu bo pian ,xing cheng chan xi bao ceng ,fen bie gei yu 5 mmol/Lhe 100 mmol/Ljia li zi nong du de yu ye ,mo pian qian chan tong dao ji lu BKαde li zi liu 。nei xiang zheng liu xing jia tong dao Kir4.1de ye sheng xing he tu bian xing （G77R、G130R、C140Rhe R297C）fen bie zhuai ran wen ding zhuai ran BKαde HEK293xi bao hou di qu mo dan bai ,Western blottingjian ce BKαde biao da qing kuang 。jie guo ·zhuai ran hou de HEK293xi bao zhong tiao shua biao da BKαtong dao de xi bao zhu ,xi bao mian yi ying guang yan zheng le BKαtong dao biao da ji ji zai xi bao mo shang biao da 。zai gei yu 100 mmol/Ljia li zi nong du yu ye de qing kuang xia ,BKαde tong dao kai fang pin lv （NPo）kuai su zeng jia 。Kir4.1de ye sheng xing he tu bian xing fen bie zhuai ran wen ding zhuai ran BKαde HEK293xi bao hou di qu mo dan bai ,Western blottingjian ce fa xian zhuai ran Kir4.1tu bian ti zhi li de HEK293xi bao de BKαbiao da jiao ye sheng xing zeng jia （P<0.05）。jie lun ·cheng gong de jian li le wen ding biao da BKαde HEK293xi bao zhu ,BKαtong dao ke yi bei gao jia rong ye ji huo ;BKαtong dao de mo biao da shui ping yu Kir4.1tong dao gong neng zhuang tai you guan ,ke neng shi you yu tu bian de Kir4.1tong dao dao zhi xi bao qu ji hua ,cong er ji huo BKα。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自上海交通大学学报(医学版)的应思琦,张娅,郭琴,杨阳,刘爽,张翀，发表于刊物上海交通大学学报(医学版)2019年10期论文，是一篇关于大电导钙激活钾通道论文,内向整流通道论文,肾小管论文,钾离子排泄论文,上海交通大学学报(医学版)2019年10期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自上海交通大学学报(医学版)2019年10期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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