紫花牡荆素对肝癌HepG2细胞凋亡和分化的影响

论文摘要

目的：观察紫花牡荆素（Casticin, CAS）抑制人肝癌Hep G2细胞生长、诱导细胞凋亡和分化作用。评价CAS作为新型肝癌治疗药物的潜在价值。方法：用不同浓度的CAS处理Hep G2细胞,分别应用MTT比色法、平皿集落形成法、DNA琼脂糖凝胶电泳检测CAS对Hep G2细胞生长和凋亡的影响。碘化丙啶（PI）流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）检测细胞周期和细胞凋亡率；酶联免疫吸附法（ELISA）检测CAS对Hep G2细胞casepase-3活性的影响；瑞氏-姬姆萨染色显微镜测量细胞核质比。放射免疫法检测细胞液甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein, AFP）;酶促反应试剂盒检测细胞碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）和γ-谷胺酰转肽酶（γ-glutamyltrans peptidase,γ-GT）的活性；Diamond stone分光光度法测定细胞酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶（tyrosine-α-Ketoglutaric acid transaminase, TAT）的活性结果：不同浓度的CAS作用于Hep G2细胞后,Hep G2细胞生长受抑制,与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.01）; Hep G2细胞经10mg/LCAS作用后,G0/G1期细胞百分率下降（P<0.01）,S期和G2/M期细胞百分率上升（P<0.01）,G2/M期细胞百分率上升的显著（P<0.01）, Sub-G1期细胞百分率亦显著上升（P<0.01）；CAS干预组Hep G2细胞的DNA明显降解,可见细胞凋亡特征性梯状DNA条带；CAS干预组Hep G2细胞caspase-3活性明显升高,与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.01）；CAS干预组Hep G2细胞核质比下降；细胞AFP的分泌和γ-GT的活性显著降低（P<0.01）；ALP和TAT的活性则显著升高（P<0.01）。结论：1、CAS具有抑制体外培养人肝癌Hep G2细胞生长作用。2、CAS具有诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡的作用。3、CAS具有诱导人肝癌Hep G2细胞分化的作用。4、CAS抑制人肝癌Hep G2细胞生长和诱导凋亡作用机理与细胞周期G2/M期阻滞和caspase-3活化有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1. 引言
• 2. 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 3 结果
• 3.1 CAS对人肝癌HepG2细胞活性的影响
• 3.2 CAS对人肝癌HepG2细胞生长的影响
• 3.3. CAS对人肝癌HepG2细胞周期和凋亡的影响
• 3.4 CAS对人肝癌Hep G2细胞Caspase-3活性的影响
• 3.5 CAS对人肝癌Hep G2细胞凋亡特征性DNA梯形条带的影响
• 3.6 CAS对人肝癌Hep G2细胞核质比的影响
• 3.7 CAS对人肝癌Hep G2细胞特异性蛋白和酶的影响
• 4. 讨论
• 5. 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 英文缩写词表
• 攻读硕士学位期间的主要成果
• 致谢