沙鼠脑缺血再灌注和美满霉素干预后高尔基体与TGF-β1的变化及TGF-β1在高尔基体定位的研究

论文摘要

目的：探讨在沙鼠脑缺血再灌注模型中，美满霉素的神经保护作用及作用机制，高尔基体在脑缺血后的形态学改变及TGF-β1细胞内定位。方法：通过夹闭双侧颈总动脉的方法建立沙鼠脑缺血再灌注模型；50只沙鼠随机分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、美满霉素干预组（美满霉素干预+缺血再灌注）；美满霉素干预组的沙鼠在实验前1天开始腹腔注射美满霉素（45mg／kg，BID）。缺血再灌注组用同剂量生理盐水替代。缺血再灌注组及美满霉素干预组分别在缺血再灌注后（IR）6小时（6h）、1天（1d）、3天（3d）、7天（7d）的各时间点分批处死动物，快速取脑组织制作标本，采用HE染色观察海马CA1区神经细胞数目；采用免疫组织化学方法检测海马CA3区TGF-β1阳性细胞数目及前循环皮质细胞的高尔基体形态学改变；采用免疫荧光共聚焦的方法观察TGF-β1在皮质细胞高尔基体的定位情况；全部数据用SPSS15.0进行统计分析。结果：1．蒙古沙鼠经历缺血性打击后，海马CA1区神经细胞减少，这种改变在缺血再灌注后3天及7天最为明显，发生了“延迟性的神经细胞死亡”。美满霉素干预后，在缺血再灌注3天及7天组，干预组中存活的神经细胞较非干预组明显增加，美满霉素对海马CA1区“延迟性的神经细胞死亡”具有很强的保护作用。2．脑缺血再灌注后海马CA3区神经细胞TGF-β1表达水平升高，美满霉素能够降低TGF-β1的表达水平。3．在正常组、假手术组、所有美满霉素的干预组及缺血再灌注6，24，72小时组中，高尔基体没有发生明显的形态学改变，在缺血再灌注7天组中，部分皮质细胞的高尔基体发生了碎裂。4．高尔基体特异性标志物TGN38的免疫荧光及TGF-β1的免疫荧光在蒙古沙鼠皮质细胞内明显重叠。结论：1．美满霉素在沙鼠脑缺血再灌注模型中具有神经保护作用，其神经保护作用可能与改变TGF-β1表达水平有关。2．沙鼠脑缺血再灌注7天后，部分皮质细胞的高尔基体发生了碎裂。3．在沙鼠皮质细胞内，TGF-β1存在于高尔基体，表明TGF-β1的分泌依赖高尔基体，同时TGF-β1对高尔基体具有重要保护作用。

论文目录

• 中文部分
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验材料和仪器
• 1.2 实验步骤和方法
• 1.3 统计分析
• 第二章 结果
• 2.1 病理学结果
• 2.2 免疫组化结果
• 2.3 免疫荧光共聚焦结果
• 2.4 图和表
• 第三章 讨论
• 3.1 美满霉素在脑缺血再灌注中的作用及其作用机制
• 3.2 脑缺血再灌注及美满霉素干预后高尔基体的形态学改变及其作用 机制、意义
• 3.3 TGF-β1在大脑皮质高尔基体的定位研究
• 第四章 结论
• 参考文献
• 英文论文
• Article Outline
• 1. Introduction
• 2. Materials and methods
• 2.1 Animals and surgery
• 2.2 Drug treatment
• 2.3 General histology
• 2.4 Immunohistochemical methods
• 2.5 Immunofluorescence confocal microscopy
• 2.6 Data analysis
• 3. Results
• 3.1 Reduction of ischemic damage by minocycline
• 3.2 Effects of minocycline on induction of neuroprotective growth factor TGF-β1
• 3.3 Morphological alteration of GA in gerbils models postocclusion
• 3.4 Confocal immunofluorographs of TGF-β1 and TGN38 in gerbils models postocclusion
• 4. Discussion
• 5. References
• 综述
• 致谢