氮离子注入诱变选育香菇多糖高产菌株的研究

论文摘要

近年来的研究发现,香菇多糖（Lentinan,LNT）具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒等功效。它不仅是一种比较理想的药物,也是一类重要的保健食品功能因子,具有广阔的应用前景,但目前多糖的提取率普遍不高,因此,提高香菇中的多糖含量,以增加多糖的提取率已成为进行多糖产品开发需要解决的关键问题。有鉴于此,本实验采用低能氮离子注入的方法对武香一号香菇单核菌丝进行诱变,通过筛选,连续4次传代,最终获得一株稳定性良好,多糖产量达到4.354 mg/mL,较出发菌株提高16.8%的突变株WX15,且其发酵周期比出发菌缩短了2d。不同注入剂量对菌株存活率的研究结果表明,存活曲线呈现典型的“马鞍型”。当注入剂量达到1.5×1016ions.cm-2时,氮离子注入对该菌株有比较好的诱变效果。最后分别对突变株液体培养的营养因子和非营养因子进行了优化研究,确定突变株WX15摇瓶发酵培养基的最佳配方为:马铃薯15%,麦芽糖1.5%,酵母浸粉0.7%,麸皮3%, KH2PO4 0.3%,MgSO4·7H2O 0.2%;最佳培养条件为:装液量120mL/250mL,接种量12%,粘稠度0.2%,pH值5-6,温度（25±1）℃,转速160 r/min,最佳培养时间9d。本实验将氮离子注入诱变技术第一次应用于香菇多糖高产菌株的选育,在利用离子注入突变范围广、突变程度高等优点的基础上,提高了菌种选育的工作效率。

论文目录

• 内容提要
• Abstract
• 目录
• 第一章 文献综述
• 1 离子束生物工程学研究进展
• 1.1 离子束生物工程学的创立
• 1.2 离子束注入的生物学机理研究
• 1.3 离子束生物工程学的应用进展
• 1.3.1 在农作物诱变育种中的应用
• 1.3.2 在微生物诱变育种中的应用
• 1.3.3 离子束介导转基因技术
• 1.4 离子束生物工程学的发展趋势
• 1.4.1 离子束注入机理的研究
• 1.4.2 离子束生物技术的应用
• 1.4.3 离子束注入方法有待改进
• 2 香菇多糖的研究进展
• 2.1 香菇多糖的制备
• 2.1.1 香菇多糖的提取
• 2.1.2 香菇多糖中粗蛋白的去除
• 2.1.3 香菇多糖的分离纯化及纯度鉴定
• 2.2 香菇多糖的结构分析
• 2.3 香菇多糖的生物活性
• 2.3.1 特殊免疫功能
• 2.3.2 抗肿瘤功能
• 2.3.3 香菇多糖的其它作用
• 2.4 香菇多糖的发展前景
• 3 本课题的研究目的、内容及意义
• 3.1 研究目的
• 3.2 研究内容
• 3.3 研究意义
• 3.4 技术路线
• 第二章 离子注入机装置简介
• 1 装置基本情况
• 2 离子源
• 3 靶室
• 4 注入剂量和剂量率
• 5 本装置的主要技术指标
• 第三章 低能氮离子注入诱变选育香菇多糖高产菌株
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 试验材料
• 1.1.2 试剂
• 1.1.3 仪器
• 1.1.4 培养基
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 培养方法
• 1.2.2 离子注入
• 1.2.3 筛选方法
• 1.2.4 分析方法
• 2 结果与分析
• +离子注入香菇单核菌丝存活率与注入剂量间的关系'>2.1 N⁺离子注入香菇单核菌丝存活率与注入剂量间的关系
• 2.2 初筛结果
• 2.3 复筛结果
• 2.4 诱变菌株的遗传稳定性研究
• 2.5 多糖高产菌株的获得及其性状的考察
• 3 结论
• 第四章 突变株WX15 发酵工艺的优化研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 实验材料
• 1.1.2 试剂
• 1.1.3 仪器
• 1.1.4 培养基
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 培养方法
• 1.2.2 营养因子的优化
• 1.2.3 非营养因子优化
• 2 结果与分析
• 2.1 培养基的优化
• 2.1.1 母种培养基碳、氮源优化试验结果
• 2.1.2 液体培养基正交优化试验结果
• 2.2 不同培养条件对WX15 液体培养的影响
• 2.2.1 装液量
• 2.2.2 接种量
• 2.2.3 培养液粘稠度（琼脂浓度）
• 2.2.4 初始pH值
• 2.2.5 培养温度
• 2.2.6 摇瓶转速
• 2.3 液体培养过程指标测定结果
• 2.3.1 发酵过程中摇瓶总重与菌丝球干重的关系
• 2.3.2 菌丝球形态的变化
• 2.3.3 培养液pH值的变化
• 3 讨论
• 第五章 结论与展望
• 1 结论
• 2 展望
• 参考文献
• 附图
• 在读期间发表论文
• 致谢