选择性COX-2抑制剂治疗癌性恶病质的实验研究

论文摘要

目的:本实验通过构建实验性癌性恶病质动物模型,研究塞莱昔布对癌性恶病质小鼠生活状态、代谢指标、细胞因子的影响,进一步探讨预防性应用选择性COX-2抑制剂对癌性恶病质发生的影响,初步探讨塞莱昔布的抗恶病质作用及可能机制。方法:将健康雄性C57/BL/6小鼠,6-8周龄,体重20-24g, 50只随机分为5组,健康对照（HC） :10只,生理盐水组（CC） :10只,预防阻（PG）:10只,塞莱昔布组（TG）:10只,甲羟孕酮组（MPA） :10只。开始试验前,所有动物在各分组笼中饲养1周,使其适应新的实验环境。将小鼠Lewis肺腺癌细胞株皮下接种于各组小鼠,构建实验性癌性恶病质动物模型。3-5后各荷瘤小鼠皮下均可触及肿瘤结节,预防组开始用药每天给予塞莱昔布（40mg·kg-1·d-1）。荷瘤第19天,小鼠开始出现颈背部皮毛毛糙、毛色发暗,活动迟缓、消瘦、衰竭等表现,去瘤体重减少10%以上,摄食量及饮水量明显减少,小鼠进入恶病质状态。荷瘤第20天,TG和MPA组分别开始每天给予塞莱昔布（40mg·kg-1·d-1） ,甲羟孕酮（150mg·kg-1·d-1）,CC组给与等量的生理盐水分别灌胃一周,观察恶病质小鼠经药物干预后一般状况及恶病质参数的变化情况。应用全自动生化分析仪测定各组营养代谢指标,放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、瘦素（Leptin）的水平,流式细胞分析仪（FCM）测定肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况,观察比较这些指标在各组小鼠之间的差异。用SPSS13.0统计学软件进行数据处理,各组数据以均数±标准差（x±s）的形式表示,多组间均数差异性比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）。结果:1动物模型:将Lewis肺癌细胞皮下接种于各组小鼠,3-5天后各荷瘤小鼠右腋下可以触到瘤结节,小鼠精神、活动状态无明显变化。荷瘤第19天,小鼠明显消瘦,去瘤体重减轻10%以上,摄食量及饮水量明显减少,出现厌食、虚弱、衰竭,小鼠进入恶病质状态。2体重及一般状况:实验开始时,各组小鼠体重无显著性差异（Ρ>0.05）。荷瘤第27天CC组小鼠饮食量及一般状况恶化最明显,TG、MPA组小鼠一般状况较PG组小鼠差。MPA组小鼠终末去瘤体重较CC组小鼠显著升高（Ρ<0.05）,恶病质小鼠与其余各组小鼠终末去瘤体重无显著性差异（Ρ>0.05）。PG组小鼠瘤重较CC组明显减轻,具有显著性差异P<0.05)。各荷瘤组小鼠脾指数较HC组显著升高（Ρ<0.05）,PG组小鼠脾指数较CC组显著降低（Ρ<0.05）,有统计学差异。3生化指标:各荷瘤组小鼠较HC组营养指标呈现不同程度的代谢消耗状态（Ρ<0.05）。CC组小鼠血糖明显低于其余各组（Ρ<0.05）,胆固醇及甘油三脂明显高于其余各组（Ρ<0.05）。治疗后各荷瘤组小鼠肿瘤组织匀浆LDH浓度明显低于CC组（Ρ<0.05）,PG组明显低于MPA组,具有显著性差异（Ρ<0.05）,PG组与TG组之间无统计学意义（Ρ>0.05）。4血清细胞因子:HC组血清细胞因子TNF-α显著低于其余各组,具有显著性差异（Ρ<0.05）。治疗后各组小鼠血清细胞因子TNF-α较CC组显著降低（Ρ<0.05）。PG、TG组小鼠治疗后血清细胞因子TNF-α较MPA组水平低（Ρ<0.05）,且PG较TG组下降更明显,具有显著性差异（Ρ<0.05）。CC组小鼠血清瘦素水平明显低于HC组,有统计学差异（Ρ<0.05）,CC组与PG、TG、MPA组血清瘦素水平变化无统计学意义（Ρ>0.05）。5肿瘤组织中VEGF表达量:治疗后PG、TG组肿瘤组织VEGF表达量较CC组明显降低,具有统计学意义（Ρ<0.05）,CC组与MPA组比较无统计学意义（Ρ>0.05）。PG组肿瘤组织内VEGF表达量低于TG组,但无统计学意义（Ρ>0.05）。6相关分析结果显示:血清Leptin与TNF-α的相关系数r =﹣0.778（Ρ>0.05）,无统计学意义,还不能认为血清Leptin与TNF-α之间存在相关关系。结论:1本实验成功构建了一个与人癌性恶病质极为相似的动物模型,为进一步研究癌性恶病质的发生及其防治提供了良好的实验基础。2恶病质小鼠除了去瘤体重降低,体脂下降、代谢失衡外,血清TNF-α水平增高而Leptin水平显著下降,提示小鼠出现明显的糖、脂肪等代谢紊乱可能与促炎细胞因子活性升高有关。血清Leptin水平下降可能与恶病质小鼠体脂下降有关。血清Leptin与TNF-α之间无相关关系。3塞莱昔布能够改善恶病质小鼠的一般状态,调整恶病质引起的全身代谢紊乱,下调肿瘤组织内VEGF的表达量,降低血清TNF-α水平,从而起到明显的抗恶病质作用。预防性应用塞莱昔布还可提高恶病质小鼠免疫力,具有更显著的抗恶病质作用。4甲羟孕酮可显著增加恶病质小鼠终末去瘤体重,降低血清TNF-α水平,而对于提高免疫力,下调肿瘤组织内VEGF的表达从而抑制肿瘤组织生长等作用不明显。5选择性COX-2抑制剂塞莱昔布在癌性恶病质的预防和治疗中显示了积极的作用,为其临床应用提供了有利的实验依据,使其有望成为治疗癌性恶病质的另一有效手段。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 选择性COX-2 抑制剂治疗癌性恶病质的实验研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 个人简历