内蒙古西部地区自然发酵酸粥中乳酸菌的分离与鉴定

论文摘要

对内蒙古的4个不同地区13个采样地点采集的28份自然发酵酸粥中的微生物组成进行了分析,并对样品中的乳酸菌进行了分离、鉴定。28份酸粥样品的细菌总数在3.2×105cfu/mL～2.51×10~9cfu/mL,细菌总数平均值为3.71×10~8 cfu/mL,乳酸菌数在3.20×10~3cfu/mL～1.99×10~9cfu/mL之间,乳酸菌数平均值是2.98×10~8 cfu/mL。28份酸粥样品在15℃、30℃和45℃三个不同温度培养下共分离到170株菌,其中乳杆菌164株,乳酸球菌6株,对其中的82株乳杆菌和6株乳酸球菌通过形态观察、生理生化试验、糖发酵试验及16S rDNA序列分析等研究对其进行鉴定,结果表明80株乳酸菌通过传统鉴定和16S rDNA序列分析结果相一致,其余8株采用传统鉴定方法无法准确归类,经16S rDNA序列分析和系统发育树的建立将其鉴定为6株Lactobacillus fermentum和2株Enterococcus saccharominimu,其余菌株均采用16S rDNA同源性序列分析的方法进行了分类归属。170株乳酸菌中64株L.fermentum(占总分离株的37.6%)和61株L.casei (35.8%)是酸粥样品中的优势乳酸菌菌群,同时还分离到了26株L.plantarum(15.2%)、6株L.helveticus(4.6%)、4株L.brevis( 2.3%) ,和少数的L.reuteri、L.hamster、E.saccharominimus、Lactococcus lactis subsp.lactis、E.faecalis。其中有24株乳酸菌能够在pH3.0琼脂培养基上生长。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 酸粥
• 1.1.1 酸粥及其制作工艺
• 1.1.2 酸粥的现状及其发展趋势
• 1.2 乳酸菌
• 1.2.1 乳酸菌概述
• 1.2.2 乳酸菌的分类研究
• 1.2.3 乳杆菌属
• 1.2.4 乳酸球菌属
• 1.2.5 乳酸菌资源研究的现状
• 1.3 立题的意义与研究内容
• 1.3.1 立题的目的及意义
• 1.3.2 本课题主要研究内容
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 酸粥样品来源
• 2.1.2 乳酸菌标准菌株
• 2.1.3 乳酸菌分离及生理生化试验培养基
• 2.1.4 16S rDNA 序列分析试验试剂
• 2.1.5 仪器设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 酸粥样品的采集
• 2.2.2 酸粥样品中微生物组成分析
• 2.2.3 酸粥样品中乳酸菌的分离纯化及保存
• 2.2.4 酸粥样品中乳酸菌的鉴定及其生物学特性的研究
• 3 结果与分析
• 3.1 酸粥样品的温度和pH 值
• 3.2 酸粥样品的微生物组成分析
• 3.3 酸粥样品中乳酸菌的分离
• 3.3.1 分离株的来源、分离温度和分离株数
• 3.3.2 分离株的菌落形态和菌体细胞形态
• 3.4 乳酸菌的鉴定
• 3.4.1 乳杆菌属的传统生理生化鉴定
• 3.4.2 乳杆菌属内种的鉴定
• 3.4.3 乳酸球菌属的传统生理生化鉴定
• 3.4.4 乳酸球菌属中种的糖类发酵鉴定
• 3.4.5 16S rDNA 同源性序列分析
• 3.4.6 系统发育树的构建
• 4 讨论
• 4.1 酸粥样品中乳酸菌数分析
• 4.2 酸粥样品中乳酸菌的分布分析
• 4.2.1 酸粥样品中乳酸菌的地区分布
• 4.2.2 酸粥样品中乳酸菌的温度分布
• 4.3 酸粥样品中乳酸菌的传统鉴定
• 4.4 16S rDNA 同源性分析
• 4.5 内蒙古西部地区自然发酵酸粥中乳酸菌的多样性
• 4.5.1 酸粥样品中的乳酸菌
• 4.5.2 酸粥样品中产生粘性物质的乳酸菌
• 4.5.3 酸粥样品中耐酸乳酸菌筛选
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 作者简介