论文摘要
核酶（ribozyme or RNAzyme）是一类具有催化活性的单链寡RNA分子,它能通过碱基配对特异性地切割底物RNA。脱氧核酶（Deoxyribozymeor DNAzyme）是上世纪90年代通过体外筛选获得的一类具有催化活性的DNA分子。我们以β-内酰胺酶mRNA为靶目标,设计并合成了DNAzyme-RNAzyme（DR）基因,将其克隆到pBluescript II KS（+） phagemid中,筛选得到重组子,通过噬菌粒复制产生含有DNAzyme序列的单链环状DNA分子（CDR）。体外实验表明,CDR在某些二价金属离子辅助下具有特异性切割RNA底物的功能。重组噬菌粒经体外转录后（T3启动子）,其转录产物（LDR）含RNAzyme序列,体外实验表明,LDR也有特异切割底物RNA的活性。考虑到CDR与LDR都具有切割单链RNA活性,根据中心法则,我们合成了DR基因编码多肽（PDR）,实验证明PDR也能切割单链RNA。这样,我们通过合理设计实现了DNAzyme→RNAzyme→pepzyme。DNAzyme→RNAzyme→pepzyme可能是中心法则的一种模型。体内实验中,将CDR电转化Ampr耐药菌株TEM-1和TEM-3,CDR在胞内有较高的抑菌效率。我们进一步研究了核酶与脱氧核酶编码多肽的活性,发现锤头核酶、HDV核酶以及RNaseP开放阅读框序列编码的多肽均具有切割单链RNA的作用。我们将由核酶编码的具有催化活性的多肽称为核肽酶（ribopepzyme）。根据DNAzyme→RNAzyme→pepzyme以及核酶编码核肽酶,我们提出了“酶编码酶”的概念,“酶编码酶”将早期进化中的DNA、RNA、蛋白质（多肽）联系起来。