本文主要研究内容
作者吴锦艳,田宏,陈妍,王光祥,尚佑军,张志东（2019）在《靶向抑制PRRSV复制的Nsp9/shRNA的筛选及干扰》一文中研究指出：RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,使机体具有抗病毒的功效,本试验针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp9基因设计多对shRNA序列,并从细胞水平验证其干扰效果,从中筛选可以使Nsp9基因沉默的优势shRNA序列。利用BLOCK-iTTM RNAi Designer软件设计并合成shRNA对应的DNA序列-ds Oligo,构建入门载体pENTR/U6/shRNA;采用共转染技术,经荧光显微镜观察、流式细胞仪检测及Real-time RT-PCR分析等方法筛选优势干扰序列。结果显示:成功构建的6对pENTR/U6/Nsp9-shRNA均具有抑制Nsp9基因表达的效果,其中pENTR/U6/Nsp9-4和pENTR/U6/Nsp9-6的抑制效果更为突出,同时成功构建1对无意义对照pENTR/U6/con-shRNA。结果表明:pENTR/U6/Nsp9-4和pENTR/U6/Nsp9-6两株优势干扰序列的成功筛选可为构建具有干扰PRRSV复制效果的稳定细胞系以及靶向PRRSV的siRNA的转基因动物提供素材。
Abstract
RNAiji shu ke yi te yi xing ti chu huo guan bi te ding ji yin de biao da ,shi ji ti ju you kang bing du de gong xiao ,ben shi yan zhen dui zhu fan shi yu hu xi zeng ge zheng bing du (PRRSV)Nsp9ji yin she ji duo dui shRNAxu lie ,bing cong xi bao shui ping yan zheng ji gan rao xiao guo ,cong zhong shai shua ke yi shi Nsp9ji yin chen mo de you shi shRNAxu lie 。li yong BLOCK-iTTM RNAi Designerruan jian she ji bing ge cheng shRNAdui ying de DNAxu lie -ds Oligo,gou jian ru men zai ti pENTR/U6/shRNA;cai yong gong zhuai ran ji shu ,jing ying guang xian wei jing guan cha 、liu shi xi bao yi jian ce ji Real-time RT-PCRfen xi deng fang fa shai shua you shi gan rao xu lie 。jie guo xian shi :cheng gong gou jian de 6dui pENTR/U6/Nsp9-shRNAjun ju you yi zhi Nsp9ji yin biao da de xiao guo ,ji zhong pENTR/U6/Nsp9-4he pENTR/U6/Nsp9-6de yi zhi xiao guo geng wei tu chu ,tong shi cheng gong gou jian 1dui mo yi yi dui zhao pENTR/U6/con-shRNA。jie guo biao ming :pENTR/U6/Nsp9-4he pENTR/U6/Nsp9-6liang zhu you shi gan rao xu lie de cheng gong shai shua ke wei gou jian ju you gan rao PRRSVfu zhi xiao guo de wen ding xi bao ji yi ji ba xiang PRRSVde siRNAde zhuai ji yin dong wu di gong su cai 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国兽医学报的吴锦艳,田宏,陈妍,王光祥,尚佑军,张志东，发表于刊物中国兽医学报2019年01期论文，是一篇关于干扰论文,筛选论文,中国兽医学报2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国兽医学报2019年01期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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