山羊FSHβ基因多态性及其与产羔数相关性分析

论文摘要

促卵泡素是一种垂体糖蛋白促性腺激素,影响动物的生殖系统发育和雄性动物精子的生成,常用于常用与胚胎移植和超数排卵,是促进卵泡的生长、发育、成熟和排卵必不可少的激素。天府肉羊是四川农业大学历经28年采用多品种复杂育成杂交育种技术选育成功的肉山羊新品系。本实验以四川农业大学羊业科教中心和汇源牧业有限公司培育的166只天府肉羊、101只波尔山羊和67只成都麻羊为研究对象,对FSHβ基因PCR-SSCP的遗传多样性进行研究及其与产子数的相关性分析。本研究参照GeneBank中的牛、绵羊和猪等物种的FSHβ基因序列,设计PCR引物,扩增山羊FSHβ基因的5′调控区、外显子1和外显子2。结果表明:FSHβ基因的5′调控区,发现1个SNP位点,是A712G。FSHβ基因引物1在天府肉羊和波尔山羊中均为中度度多态（0.25＜PIC＜0.5）,在成都麻羊中为低度多态（PIC＜0.25）。x 2适合性检验表明:引物1扩增片段均在波尔山羊中极显著的偏离了Hardy-Weinbe平衡（P＜0.01）,而在天府肉羊和成都麻羊中都保持了Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）。对有产羔记录的山羊突变位点和胎次与它的产羔数进行最小二乘分析,结果表明:AA基因型天府肉羊头胎产羔数最小二乘均值分别比BB基因型多0.39只（P＜0.05）,第二胎、第三胎比头胎产羔数分别多0.6（P＜0.05）,0.87 P＜0.01)。AA型基因型在成都麻羊中第三胎的产羔数最高为2.60只,AA型基因在三个品种山羊第二胎和第三胎（包括以上）的高产作用强于在头胎中的作用（P＜0.05）;AA基因型在各品种各胎次中的产羔数高于BB基因型(P＜0.05。本研究中发现的1对引物与山羊的繁殖性状有关,但还需进一步研究。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 1 文献综述
• 1.1 FSH的研究现状
• 1.1.1 FSH的概况
• 1.1.2 FSH的性质与作用
• 1.1.2.1 FSH的化学结构与性质
• 1.1.2.2 FSH的分泌与代谢
• 1.1.2.3 FSH的生理作用及其作用机理
• 1.2 FSH基因的分子结构
• 1.2.1 FSHβ的多产性的效应
• 1.3 FSH的应用
• 1.3.1 FSH应用基础
• 1.3.2 FSH在动物繁殖育种中的应用
• 1.4 分子标记方法概述
• 1.4.1 数量性状基因的标记方法
• 1.4.2 SNP分子标记
• 1.4.3 PCR-SSCP
• 1.5 研究目的和意义
• 2 试验材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 试验样本
• 2.1.2 试验主要仪器
• 2.1.3 主要试剂及配制
• 2.2 分析工具软件
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 DAN的提取
• 2.3.2 DNA浓度和纯度的检测
• 2.3.3 引物的设计与合成
• 2.3.4 PCR反应条件的确定
• 2.3.5 PCR产物的检测
• 2.3.6 PCR扩增产物的PCR-SSCP分析
• 2.4 数据处理与统计分析
• 2.4.1 基因频率
• 2.4.2 基因型频率
• 2.4.3 遗传多态性分析
• 2.4.4 多态信息含量（Polymorphic information content,PIC）
• 2.4.5 Hardy-Weinberg平衡状态的检验
• 2.4.6 基因型与天府肉羊、波尔山羊和成都麻羊产羔数相关性分析
• 3 试验结果与分析
• 3.1 基因组DNA的提取
• 3.2 山羊FSHB基因PCR扩增结果
• 3.2.1 引物1 PCR产物的扩增结果
• 3.2.2 引物2 PCR产物的扩增结果
• 3.2.3.PCR3 PCR产物的扩增结果
• 3.3 PCR-SSCP结果多态性检测
• 3.3.1 引物1 PCR-SSCP检测结果
• 3.3.2 引物2 PCR-SSCP检测结果
• 3.3.3 引物3 PCR-SSCP检测结果
• 3.3.4 山羊FSHβ基因不同基因型测序结果
• 3.4 山羊FSHB基因遗传多态性的分析
• 3.4.1 山羊FSHβ基因和各基因型在不同品种中的频率分析
• 3.4.2 FSHβ基因在不同山羊品种内的遗传异变分析
• 3.4.3 各基因型与山羊产羔数相关研究
• 4.讨论
• 4.1 DNA的提取
• 4.2 PCR扩增的优化
• 4.3 PCR-SSCP的优化
• 4.4 山羊FSHB基因多态性分析
• 4.5 山羊FSHB基因型与产羔数的相关性分析
• 4.6 山羊群体遗传多样性与保护
• 5.结论
• 参考文献
• 致谢