梁汉才杨福义(黑龙江省佳木斯大学154007)
【中图分类号】R730.5【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2011）12-0042-02
【摘要】目的探讨NF-κB和TNF-α与动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aSAH）后脑血管痉挛（CVS）之间的关系。方法对42例aSAH患者血液核转录因子-κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）分别进行动态检测，用经颅多普勒超声（TCD）检测大脑中动脉血流速度（VMCA）。结果aSAH患者血液NF-KB在发病后1-3d、7-9d各均值明显高于对照组，TNF-α在发病后l-3d、7-9d各均值明显高于对照组。结论aSAH患者NP—KB、TNF-α含量变化与CVS呈正相关。
【关键词】动脉瘤性蛛网膜下腔出血脑血管痉挛核转录因子-κB肿瘤坏死因子-α经颅多普勒
脑血管痉挛（CVS）是动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aSAH）后最严重的并发症之一，是aSAH病人致残、致死的主要原因[1]。aSAH后CVS的发生机制目前尚不十分清楚，但炎症反应在其中起了重要作用[2]。研究表明，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等细胞因子在其中起了重要作用，而核转录因子-KB（NF-KB）是TNF-α等诸多细胞因子的启动子。因此，通过对aSAH病人血液NF-KB、TNF-α的动态检测，探讨其作为判断病情、观察疗效、指导临床治疗的有效指标的可行性。
1资料与方法
1.1一般资料收集了近期本院aSAH患者42例，其中男20例、女22例；年龄32～74岁，平均年龄（56.4±14.2）岁；所以患者入院后第3、7、9、14天分别进行TCD检测，将任何一次大脑中动脉的平均流速（VMCA）>120cm/s视为CVS。根据TCD检测结果将患者分为：无CVS组13人，CVS组29人。再将CVS组继续分为：轻度CVS组（VMCA120～140cm/s）11人，中度CVS组（VMCA140～200cm/s）12人，重度CVS组（VMCA>200cm/s）6人。选择同期健康体检者40例作为对照组，其中男19例、女21例；年龄22～70岁，平均年龄（54.9±10.1）岁。对照组和患者组的平均年龄及性别无明显差异，具有可比性（P>0.05）。
1.2方法所有病例均在发病后1～3d、7～9d、13～15d清晨同一时间段分别采取外周静脉血5ml／人次，肝素抗凝，在4℃条件下离心10分钟，分离血浆，提取外周血单核细胞，涂片并同定，置于-80℃冰箱保存备用。一抗选用兔抗NF-KBp65亚单位的多克隆抗体，用SABC试剂盒（武汉博士德公司提供）进行操作，白细胞NF-KB活性测定用HPLAS-1000彩色病理图像分析系统测定，其活性用吸光度A值表示。另外在相同时段空腹采集静脉血5ml，ELISA法进行检测（试剂盒由武汉博士德公司提供）TNF-α水平。对照组采血后检测方法同上。
1.3统计学处理使用SPSS13.0对各项资料进行统计、分析，计量资料以均值±标准差（x-±s）表示，计量资料采用t检验，计数资料采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
表1不同患者血清中NF-κB（A值）含量比较（x-±s）
注：与对照组比较：*P<0.05，#P<0.05；与无CVS组同一时间点比较：#P<0.05
由表1可见，患者组（无论有无脑血管痉挛）血清中NF-κB含量均有升高，与对照组比较（1～3d和7～9d）差异具有统计学意义（P<0.05）。CVS组与无CVS组比较差异只在SAH早期（1～3d）有显著性（P<0.05），之后（7～9d和13～15d）差异无显著性。
表2不同患者血清中TNF-α含量比较（pg/ml）
注：与对照组比较：*P<0.01，#P<0.01；与无CVS组比较：#P<0.01
由表2可见，患者组（无论有无脑血管痉挛）血中TNF-α含量均有升高，但在第7～9天含量最高，CVS组患者TNF-α含量升高更明显，各组之间TNF-α含量比较差异均有显著性（P<0.01）。
表3不同血管痉挛程度患者血清中NF-κB（A值）含量比较（x-±s）
注：同一时间点，与轻度CVS组比较：*P<0.05#P<0.05，与中度CVS组比较：#P<0.05
由表2可见，各CVS组患者血中NF-κB含量均有升高，并且痉挛程度越重NF-κB升高越明显，各CVS组之间NF-κB升高程度存在差异，这种差异只在SAH早期（1～3d）有显著性（P<0.05），之后差异无显著性。
表4不同血管痉挛程度患者血清中TNF-α含量比较（pg/ml）
注：与轻度CVS组比较：*P<0.05#P<0.05，与中度CVS组比较：#P<0.05
由表4可见，各CVS组患者血清中TNF-α含量均有升高，7～9天最高，并且痉挛程度越重TNF-α升高越明显，各CVS组之间不同时间点TNF-α含量比较差异均有显著性（P<0.05）
3讨论
aSAH后CVS发生的原因和机理至今尚未完全阐明，但总体认为炎症反应在CVS的发生中起重要作用。TNF-α是主要的致炎因子，TNF-α等参与了CVS的发生，并与CVS密切相关。在本实验中CVS患者的TNF-α含量明显高于无CVS的患者，说明TNF-α异常升高可能与aSAH后血管的炎症反应及CVS关系密切。NF-KB是具有多向性调节作用的一类蛋白质因子，通过调控多种基因的表达，发挥NF-KB对不同靶基因的调控作用[3]。本实验研究发现，与对照组比较，在aSAH患者不同时间段血液中NF-KB的浓度均相应的升高，但在SAH早期（1-3d）升高更为明显，之后（7-9d）维持在一个较高水平，随后逐渐恢复。而CVS主要发生在SAH后7-9d。NF-KB的高表达发生在SAH的早期，与CVS的发生有时段上的先后性。提示CVS的发生可能是受NF-KB启动诱发的。
本实验研究发现CVS组与无CVS组不同时间段NF-KB的表达只在CVS的早期差异有统计学意义，之后差异无统计学意义，这同样说明NF-KB只在CVS的早期发生作用。中、重度痉挛患者NF-κB，TNF-α表达较轻度患者明显升高，说明NF-κB，TNF-α表达程度与脑血管痉挛程度相一致，并且NF-κB的高表达与TNF-α的高表达是相一致的。同样提示了早期NF-κB的高表达诱发了随后TNF-α的高表达，二者在表达强度上有一定的相关性，早期NF-κB的高表达导致TNF-α的高表达，进而引发CVS的发生。NF-KB的高表达与TNF-α的高表达有时段上的先后性，NF-KB的高表达发生在SAH的早期、CVS的前期，TNF-α的高表达发生在CVS期，恰恰与CVS的发生相一致。提示CVS的发生可能是受NF-KB启动诱发，而由TNF-α等炎症因子作用表达的。NF-KB的高表达提示病情较重，预示有CVS的发生；TNF-α的高表达表示病情较重，有CVS的发生。
参考文献
[1]TreggiariMM,WalderB,SuterPM,etal.Systematicreviewofthepreventionofdelayedischemicneurologicaldeficitswithhypertension[J].Neurosurg,2003,98:978-984.
[2]张健,王中,周岱,等.NF-κB、ICAM-1在实验性SAH后基底动脉壁上的表达变化[J].中风与神经疾病杂志,2009,26(6):684-688.
[3]冀勇,王志刚,丁璇,等.兔蛛网膜下腔出血后NF-KB在基底动脉的表达[J].中华神经外科杂志,2007,23(10):780-782.