论文题目: 几种蜘蛛毒素的结构与功能研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 生物化学与分子生物学
作者: 曾雄智
导师: 梁宋平
关键词: 蜘蛛毒素,去整合素,膜片钳和电压钳,单层小脂质体,序列归属
文献来源: 湖南师范大学
发表年度: 2005
论文摘要: 敬钊缨毛蛛（Chilobrachys jingzhao）是最近在我国海南省发现的一种蜘蛛新种。通过阳离子交换与反相高效液相色谱层析,从该蜘蛛粗毒中纯化到两种新组分,并分别命名为敬钊缨毛蛛毒素-Ⅴ（Jingzhaotoxin-Ⅴ）和敬钊去整合素—Ⅰ（Jingzhaotin-Ⅰ）。MALDI-TOF质谱鉴定和Edman降解测序结果表明:JZTX-Ⅴ的分子量为3605.73Da,含有29个氨基酸残基;而Jingzhaotin-Ⅰ的分子量为3631.42Da,含有34个氨基酸残基。我们还采用cDNA末端快速扩增（RACE）法获得了它们的全长cDNA序列,并由此推测出JZTX-Ⅴ和Jingzhaotin-Ⅰ的前体分别含有83和66个氨基酸残基。为了更好的了解它们的结构与功能的关系,利用同源模建技术模建了敬钊缨毛蛛毒素-Ⅴ和敬钊去整合素—Ⅰ分子的三维结构。Jingzhaotin-Ⅰ是首次报道源于蜘蛛粗毒的一个含有KGD序列的去整合素。该肽拥有抗凝血活性,能够抑制ADP诱导的人血小板的聚集。在较低浓度时它能促进人的血小板聚集,而较高浓度时则抑制血小板聚集,进一步推测它的作用位点可能是血小板糖蛋白受体Ⅱb/Ⅲa。膜片钳和电压钳实验表明,JZTX-Ⅴ能够抑制大鼠背根神经节（DRG）细胞上的TTX不敏感型以及TIX敏感型钠通道,其IC50值分别是19.8和35.4nM。JZTX-Ⅴ对处于静息关闭与失活状态的TTX不敏感型与TTX敏感型钠通道均表现出非常高的亲和性。JZTX-Ⅴ能够抑制外源表达于非洲爪蟾卵母细胞上的Kv4.2钾通道(IC50值为604.2nM),但对表达的Kv1.2、Kv1.3和Kv1.4钾通道却没有影响。JZTX-Ⅴ能够引起TTX不敏感型与TTX敏感型钠通道的起始激活电压或最大峰值电流激活电压分别往去极化方向漂移约10mV,而它们的半数稳态失活电压却往超极化方向漂移约
论文目录:
中文摘要
英文摘要
第一章 钠、钾离子通道及其毒素研究进展
1.1 离子通道的主要类型
1.2 离子通道的主要功能
1.3 离子通道的主要研究方法
1.4 钾离子通道及其毒素研究进展
1.5 电压门控钠离子通道毒素的结构与功能
1.6 本课题研究的背景和意义
第二章 敬钊缨毛蛛毒素-V和敬钊去整合素-I的结构与功能研究
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.3 结果
2.4 讨论
第三章 敬钊缨毛蛛毒素JZTX-I的~1H-NMR信号归属、二级结构以及磷脂膜结合活性分析
3.1 材料与方法
3.2 结果
3.3 讨论
第四章 雷氏大疣蛛毒素的分离纯化及活性鉴定
4.1 前言
4.2 材料和方法
4.3 结果
4.4 讨论
第五章 主要研究结论与进一步研究设想
5.1 主要研究结论
5.2 进一步研究设想
参考文献
附录 1
附录 2
附录 3
附录 4
附录 5
附录 6
论文发表情况
致谢
发布时间: 2006-07-14
参考文献
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- [2].敬钊缨毛蛛毒素与电压门控钠离子通道作用机制研究[D]. 罗吉.湖南师范大学2014
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