氯化-3-丙酰-5-胺基荧光素三苯基鏻的合成及与生物活性物质相互作用研究

论文摘要

季鳞盐类化合物具有抗肿瘤活性作用的研究在上世纪70年代末就有报道,但至今相关的研究并不多。有人提出,季鳞化合物抗肿瘤的机理主要源于肿瘤细胞线粒体膜表面的高的膜（负）电位,鳞阳离子可选择性地被吸附到肿瘤细胞线粒体膜表面,通过干扰膜的代谢而杀死肿瘤细胞。为进一步研究该类化合物的抗肿瘤机理,我们注意到荧光素类化合物可以呈现强烈荧光发射的特性,并已常用作指示剂和生物染色剂,在临床上用做诊断试剂,也是一种防腐药和轻泻剂,可用于防癌治疗。氨基荧光素广泛用于重要荧光探针的合成,如马来酰亚胺荧光素、异硫氰酸荧光素、C12荧光黄,而这些荧光探针在DNA序列分析、蛋白质结构分析鉴定、核酸和核苷酸分析测定、生物膜结构以及脂质转运和代谢动力学研究等领域中都得到广泛应用。本文以此为切入点,选取含有活性基团氨基的5-氨基荧光素进行鳞化修饰,合成相应的季鳞盐类化合物,并进一步通过荧光光谱法对其进行荧光性能测试,研究这类化合物与DNA、蛋白质、脂质体膜的作用机制,以期最终揭示季鳞盐类化合物在结构与抗肿瘤机制的关系以及其在生物体内代谢动力学。本阶段性研究工作主要包括以下两个方面内容：1.氯化-3-丙酰-5-氨基荧光素三苯基鏻的合成以4-硝基邻苯二甲酸和间苯二酚为初始原料,制备5-氨基荧光素,进一步与3-氯丙酰氯反应,所得产物纯化后再与三苯基膦反应,得到氨基荧光素季鳞盐,合成的目标化合物未见文献报道,经IR、1HNMR、13CNMR、31PNMR表征,与预期产物结构完全吻合。2.目标化合物的荧光性质测试采取荧光光谱法对目标化合物的荧光性质进行测试,并研究加入DNA、蛋白质、脂质体膜后其荧光强度变化及波峰改变情况,测试结果表明其荧光强度与浓度之间存在明显的线性关系,DNA、蛋白质、脂质体膜对其荧光强度和波峰位置没有明显的影响。结果表明,5-氨基荧光素接入季膦结构后,与DNA、蛋白质、脂质体膜之间没有发生相互作用,既意味着季鏻化合物抗肿瘤作用机理在一般意义上不涉及与上述化合物的作用,也为后续的代谢动力学研究做了基础性的工作。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 抗肿瘤药物作用机理研究现状
• 1.3 抗肿瘤药物机理研究分类
• 1.4 季鳞盐类化合物的研究进展
• 1.4.1 季鳞盐抗肿瘤活性
• 1.4.2 季鳞盐类化合物的抗肿瘤机理
• 1.5 荧光素概述
• 1.6 荧光素的结构修饰及在生物分析中的研究进展
• 1.6.1 荧光素亲脂性的改进及在细胞和酶活性分析中的应用
• 1.6.2 荧光素特异选择性的改进及在生物分析中的应用
• 1.6.3 氨基荧光素的结构修饰及在生物分析中的应用
• 1.7 选题的目的与研究意义
• 参考文献
• 第二章 氯化-3-丙酰-5-氨基荧光素三苯基鏻的合成及表征
• 2.1 引言
• 2.2 荧光素及其衍生物在生物分析中的应用
• 2.2.1 荧光素亲脂性修饰及在细胞和酶活性分析中的应用
• 2.2.2 荧光素特异选择性的改进及在生物分析中的应用
• 2.3 设计思想
• 2.4 实验部分
• 2.4.1 原料规格及来源
• 2.4.2 测试仪器
• 2.4.3 目标化合物的合成
• 2.4.3.1 5（6）-硝基荧光素的合成
• 2.4.3.2 5-氨基荧光素的合成
• 2.4.3.3 5-（3-氯丙酰胺基）荧光素的合成
• 2.4.3.4 氯化-3-丙酰-5-氨基荧光素三苯基鳞的合成
• 2.5 结果与讨论
• 2.5.1 有关目标化合物分合成研究
• 2.5.2 目标化合物的波谱分析
• 2.5.2.1 目标化合物的IR分析
• 1HNMR、¹³CNMR、³¹PNMR分析'>2.5.2.2 目标化合物的¹HNMR、¹³CNMR、³¹PNMR分析
• 2.6 小结
• 参考文献
• 第三章 氯化-3-丙酰-5-氨基荧光素三苯基鳞盐的荧光光谱性质研究
• 3.1 引言
• 3.2 DNA荧光标示的机理与方法
• 3.3 3-P-5-ATPC的荧光性质测试
• 3.3.1 仪器和材料
• 3.3.2 实验步骤
• 3.3.2.1 标准储备液的制备和氯化-3-丙酰-5-氨基荧光素三苯基鳞盐的荧光性能检测
• 3.3.2.2 标准曲线的制备
• 3.3.2.3 目标化合物与DNA、蛋白质、脂质体膜作用的荧光性质检测
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 3-P-5-ATPC的荧光性能分析
• 3.4.2 3-P-5-ATPC的荧光光谱分析
• 3.5 小结
• 参考文献
• 第四章 氯乙酰基-（1-氨基蒽醌）三苯基季鳞盐的合成及表征
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 主要仪器
• 4.2.3 主要的实验原料、试剂及其处理
• 4.2.4 目标化合物的合成路线
• 4.2.5 目标化合物的合成
• 4.2.5.1 N-氯乙酰甘氨酰-a-氨基蒽醌的合成
• 4.2.5.2 氯乙酰基-（1-氨基蒽醌）三苯基季鳞盐
• 4.3 目标化合物的荧光性质测试
• 1HNMR,¹³CNMR,³¹PNMR波普分析'>4.4 目标化合物的IR,¹HNMR,¹³CNMR,³¹PNMR波普分析
• 4.5 目标化合物的荧光光谱分析
• 4.6 小结
• 参考文献
• 结论
• 附录
• 硕士期间所从事工作
• 致谢