论文摘要
早在20世纪70年代Schuyler等就首次提出肺脏可能是糖尿病(diabetes mellitus, DM)的靶器官之一。随着糖尿病并发症研究的深入,糖尿病肺部损害已经越来越受到关注。糖尿病时肺部呈非特异性功能变化,如肺弥散功能下降,易于发生肺纤维化,合并感染等。1型、2型糖尿病患者存在不同程度的限制性、阻塞性或混合性通气障碍及弥散障碍,但发生机制尚不清楚。近年来的研究表明核转录因子(nuclear factor kappa B NF-κB)及其抑制蛋白(inhibitorκB, IκB)信号通路在糖尿病及其并发症的发生发展中起重要作用。目的:本试验旨在通过检测2型糖尿病大鼠肺组织中NF-κB P65、IκBα、TGF-β1、PKC的变化情况及相关性,探讨糖尿病肺组织损伤与核转录因子(NF-κB)及其抑制蛋白IκB信号通路的关系,提出NF-κB信号通路激活可能是糖尿病肺发病机制之一,同时观察具有抗炎作用的噻唑烷二酮类(thiazolidinediones,TZDs)降糖药物罗格列酮的干预作用,从而为治疗糖尿病肺提供实验依据。方法:通过高糖、高脂饮食加腹腔注射小剂量链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法,建立2型糖尿病大鼠模型,采用光镜动态观察12w、24w时,对照组、糖尿病组、罗格列酮治疗组的大鼠肺组织的形态学改变情况,用Masson三色染色观察肺组织胶原沉积情况,应用免疫组织化学(immunohistochemistry)方法检测各组肺组织NF-κB P65、IκBα、TGF-β1、PKC的变化情况。结果:1.症状、体征糖尿病组大鼠在注射STZ后一周内出现多尿、多饮、多食症状,12w时症状已明显。随病程的延长,上述症状更加显著,并出现毛发干燥,色泽黯淡,反应迟钝,活动减少。整个病程中体重稍有下降,与正常对照组无统计学差异。罗格列酮治疗组大鼠的上述症状无明显改善。2.生化指标的改变:12w时,DM组大鼠空腹血糖、胰岛素、甘油三酯较对照组明显增加(P<0.05)。随着病程延长至24w时DM组大鼠的甘油三酯水平较12w时增高更加明显,同时胆固醇水平也明显升高,与对照组和12w DM大鼠相比均有显著性差异(P<0.01);而空腹血糖和胰岛素一直维持在较高水平,12w与24w的变化不明显。罗格列酮治疗组大鼠空腹血糖、甘油三酯较同期DM组有下降但无统计学意义,胰岛素和胆固醇明显下降,与DM大鼠组相比较,胰岛素水平具有显著差异(p<0.05)。3.HE染色结果:光镜下可见对照组大鼠肺泡分布均匀,结构完整,由单层肺泡上皮和基膜组成,相邻肺泡之间有少量结缔组织。12w DM大鼠肺组织结构紊乱,支气管壁、肺泡壁增厚,肺泡上皮细胞显示不清,肺泡萎缩、塌陷,肺间质和血管周围细胞外基质增多,成纤维细胞增多,并有炎症细胞浸润。24w DM大鼠的上述病理改变更加明显。罗格列酮治疗组肺组织病变较对照DM组明显减轻,但肺组织结构未恢复到正常。4.Masson染色结果:对照组大鼠肺间质之间、血管周围有少量胶原纤维。12w时DM大鼠肺间质胶原纤维增多,排列紊乱,毛细血管周围胶原物质增多,胶原面密度为0.08±0.02,高于同期对照组大鼠肺组织胶原面密度(0.05±0.06),但无统计学意义。随着糖尿病病程延长,上述改变加重,至24w时肺组织结构紊乱,肺泡萎缩,甚至被胶原纤维取代。24w时DM大鼠肺脏胶原面密度为0.27±0.03,明显高于对照组大鼠(0.08±0.03,P<0.01);与12w比较,24w时DM大鼠肺脏胶原面密度亦明显增高(P<0.01)。罗格列酮治疗组肺组织胶原积聚减轻,结构趋于正常。罗格列酮组肺脏胶原面密度为0.16±0.01,两两比较结果显示,对照组与24w DM组, 24w DM组与罗格列酮组之间均有显著差异(p<0.01),而对照组与罗格列酮组有差异(p<0.05)。5.免疫组织化学检测5.1 NF-κB P65在肺组织中的表达12w DM大鼠阳性表达稍增加,染色浅,阳性染色光密度值为0.20±0.01,大于同期对照组0.12±0.02,有差异(p<0.01);24w DM大鼠阳性染色光密度值为(0.35±0.06),表达明显增多,胞浆、胞核的棕黄色颗粒颜色较深,可见团块状分布,多于12w DM大鼠(0.20±0.01),有显著性差异(p<0.01);亦明显高于同期对照组(0.17±0.03,p<0.01);罗格列酮治疗组大于对照组,少于24w DM大鼠组,阳性染色光密度值为0.25±0.05,两两比较结果显示,对照组与24w DM组,对照组与罗格列酮组,24w DM组与罗格列酮组之间均有明显差异(p<0.01)。5.2 IκBα在肺组织中的表达12w DM大鼠阳性表达稍增加,染色浅,阳性染色光密度值为0.29±0.002大于同期对照组(0.18±0.02,p<0.01);24w DM大鼠阳性染色光密度值为(0.36±0.03),表达明显增多,胞浆、胞核的棕黄色颗粒颜色较深,可见团块状分布,大于12w DM大鼠(0.20±0.01),有显著性差异(p<0.01);亦明显高于同期对照组(0.22±0.01,p<0.05);罗格列酮治疗组大于对照组,少于24w DM大鼠组,阳性染色光密度值为0.26±0.02,两两比较结果显示,对照组与24w DM组,对照组与罗格列酮组,24w DM组与罗格列酮组之间均有明显差异(p<0.05)。5.3 TGF-β1在肺组织中的表达12w DM大鼠阳性表达稍增加,染色浅,阳性染色光密度值为0.22±0.02,大于同期对照组0.14±0.01,有差异(p<0.01);24w DM大鼠阳性染色光密度值为0.33±0.02,表达明显增多,核表达增多,着色较深,呈团块状分布,大于12w DM大鼠(0.22±0.02),有显著性差异(p<0.01);亦明显高于同期对照组(0.16±0.00,p<0.01);罗格列酮治疗组大于同期对照组,少于24w DM大鼠组,阳性染色光密度值为0.23±0.02,两两比较结果显示,对照组与24w DM组,对照组与罗格列酮组,24w DM组与罗格列酮组之间均有明显差异(p<0.01)。5.4 PKC在肺组织中的表达正常组大鼠肺泡上皮、支气管上皮胞膜及胞浆有弱的阳性表达。DM大鼠表达明显增加,染色加深,肺泡上皮表达量增多,且胞膜表达多于胞浆表达。12w DM大鼠阳性染色光密度值为0.25±0.05,明显高于同期对照组大鼠(0.15±0.03,P<0.05)。24w DM大鼠阳性染色光密度值为0.32±0.03,明显高于同期对照组大鼠(0.18±0.01,P<0.05),亦明显高于12 w组(0.25±0.05,p<0.01);罗格列酮组大于同期对照组,少于24w DM大鼠组,阳性染色光密度值为0.21±0.03,两两比较结果显示,对照组与24w DM组、对照组与罗格列酮组、24w DM组与罗格列酮组之间均有差异(p<0.01)。6.NF-κB P65与IκBα的相关性分析NF-κB P65蛋白的表达与IκBα蛋白的表达之间成正相关( r=0.8401, p<0.0001)。7. NF-κB P65与TGF-β1的相关性分析NF-κB P65蛋白的表达与TGF-β1蛋白的表达之间成正相关(r=0.8795, p<0.0004)。8.NF-κB P65与PKC的相关性分析NF-κB P65蛋白的表达与PKC蛋白的表达之间成正相关(r=0.7939, p<0.0000)。结论:1.高糖高脂饮食加小剂量STZ腹腔注射成功制备2型DM大鼠模型;2型糖尿病大鼠肺组织出现病理改变和胶原纤维成分的沉积,表明肺脏是糖尿病的又一靶器官。2. 2型糖尿病大鼠肺组织NF-κB P65、IκBα、TGF-β1表达增多,PKC活性增强。随病情进展,表达愈加明显,表明糖尿病高糖状态下,PKC活性增强,激活NF-κB,其抑制蛋白IκBα降解增多,发生核转录,表达增多,使TGF-β1激活,表达增多。同时NF-κB P65与IκBα、TGF-β1、PKC之间有正相关性,提示NF-κB/IκB信号通路参与糖尿病肺组织病变的发生发展,可能是肺损伤的机制之一。3.罗格列酮治疗组大鼠肺组织病理改变明显减轻,胶原沉积减少,肺组织中NF-κB P65、IκBα、TGF-β1、PKC的蛋白表达明显被抑制,表明罗格列酮干预治疗可减轻糖尿病肺组织病变的程度。
论文目录
相关论文文献
- [1].国家食品药品监督管理局关注罗格列酮及其复方制剂的安全性问题[J]. 中老年保健 2010(11)
- [2].安全用药:如何安全应用罗格列酮?[J]. 糖尿病新世界 2008(01)
- [3].不同厂家罗格列酮片的溶出度考察[J]. 中国保健营养 2015(05)
- [4].罗格列酮的安全性再评价[J]. 中国医院用药评价与分析 2014(06)
- [5].罗格列酮或将重新赢回美国市场[J]. 中国食品药品监管 2013(07)
- [6].“明星药物”罗格列酮的衰落[J]. 上海医药 2011(03)
- [7].脂联素:罗格列酮在心肌梗死后发挥心脏保护作用中不可或缺的分子[J]. 医学争鸣 2011(02)
- [8].最新荟萃分析结果表明罗格列酮显著增加心梗风险[J]. 中国社区医师 2010(29)
- [9].罗格列酮片溶出度分析[J]. 交通医学 2010(03)
- [10].罗格列酮或尘埃落定[J]. 中国处方药 2010(10)
- [11].客观分析,认真研究,理性对待——有关罗格列酮安全性的最近动态[J]. 中国糖尿病杂志 2010(08)
- [12].罗格列酮钠片在健康人体的生物等效性研究[J]. 药物分析杂志 2009(12)
- [13].高效液相色谱法测定盐酸罗格列酮片的含量及有关物质[J]. 药学实践杂志 2012(01)
- [14].罗格列酮降糖外作用的研究进展[J]. 中国疗养医学 2011(05)
- [15].罗格列酮的心血管风险探讨[J]. 中国社区医师 2010(19)
- [16].罗格列酮的心血管安全性[J]. 中国医院用药评价与分析 2010(09)
- [17].罗格列酮心血管风险十余年回顾[J]. 上海医药 2010(12)
- [18].罗格列酮可显著增加心脏相关疾病的风险性[J]. 广东药学院学报 2010(04)
- [19].工欲善其事,必先利其器——罗格列酮降糖有效性和安全性十年评价[J]. 中国处方药 2009(09)
- [20].罗格列酮治疗非酒精性脂肪肝病的疗效观察[J]. 中国现代药物应用 2009(17)
- [21].罗格列酮钠对2型糖尿病患者血浆同型半胱氨酸、C反应蛋白水平的影响[J]. 重庆医学 2009(22)
- [22].罗格列酮干预对冠心病患者炎症相关因子的影响[J]. 中国心血管杂志 2009(05)
- [23].罗格列酮钠治疗2型糖尿病患者疗效与安全性观察[J]. 实用糖尿病杂志 2008(06)
- [24].罗格列酮治疗糖尿病作用的研究进展[J]. 医学研究杂志 2008(05)
- [25].罗格列酮钠联合培哚普利治疗初诊代谢综合征50例分析[J]. 重庆医学 2008(19)
- [26].罗格列酮(文迪雅)为何被限制使用?[J]. 药物与人 2010(12)
- [27].超小超顺磁性氧化铁增强磁共振血管成像无创评价罗格列酮在抗兔动脉粥样硬化中的作用[J]. 中华高血压杂志 2014(06)
- [28].罗格列酮抑制同型半胱氨酸诱导内皮细胞凋亡[J]. 卒中与神经疾病 2012(02)
- [29].罗格列酮与妈富隆治疗35例多囊卵巢综合征的疗效评价[J]. 中国医药科学 2011(16)
- [30].罗格列酮对自发性高血压大鼠基质金属蛋白酶2的影响[J]. 中国煤炭工业医学杂志 2010(01)