论文摘要
牛亚洲Ⅰ(AsiaⅠ)型口蹄疫(Foot and mouth disease, FMD)是由牛AsiaⅠ型口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus, FMDV)引起的烈性传染性疾病。接种牛AsiaⅠ型FMDV灭活疫苗是控制这种疾病的有效手段。这类疫苗具有含抗原种类多,能激发保护性免疫反应的优点。但在生产过程中可能会出现病毒泄漏,且疫苗中的病毒可能未被充分灭活。为了克服上述缺点,我们开展了牛AsiaⅠ型FMDV VP1表位六聚体重组蛋白疫苗的研究。根据牛AsiaⅠ型FMDV的抗原特点,我们成功构建了其VP1表位六聚体基因片段(HBB)2,其编码的蛋白质即牛AsiaⅠ型FMDV重组疫苗,命名为A4。我们在大肠杆菌(E.coli)中成功表达了A4并对其表达条件进行了优化。结果表明:1.采用pET28a载体在E.coli中表达的A4在胞浆内形成包涵体,将其命名为A4a。2.采用pET26b载体在E.coli中表达的A4部分分泌到了周间隙,部分在胞浆内形成包涵体,将其命名为A4b。分泌型A4b的结构接近天然构象,但表达量低。3.分泌型A4b的表达条件有待于进一步优化。4.虽然在纯化过程中经历变形和复性,A4a在豚鼠能诱生高水平FMDV保护性中和抗体。本研究为研制高效的牛AsiaⅠ型FMDV重组疫苗及其它的重组疫苗提供了实验依据。