植物激素对黑曲霉生长的影响和黑曲霉的固定化

论文摘要

本论文研究了植物激素对固定化黑曲霉发酵法生产葡萄糖酸的影响,主要研究了植物激素对黑曲霉生长的增殖作用、植物激素应用于黑曲霉葡萄糖酸发酵和植物激素应用于固定化黑曲霉菌的葡萄糖酸发酵的作用。首先是通过筛选不同的植物激素对黑曲霉生长的促进作用,采用测定菌液光密度的方法判断黑曲霉的生长情况,并最终得到以赤霉素对黑曲霉的生长促进作用最为明显。然后研究了赤霉素对黑曲霉液体发酵法促进葡萄糖向葡萄糖酸的转化作用,采用3,5—二硝基水杨酸比色法测定还原糖的含量,得出赤霉素可以促进葡萄糖向葡萄糖酸的转化。最后采用包埋法（固定化材料是海藻酸钠）固定化黑曲霉,并应用于发酵实验,在固定化过程中分别添加二氧化硅和蒙脱土改进固定化方法,同样对发酵液进行还原糖的测定以筛选出最佳固定化黑曲霉的改进方法,得到黑曲霉的最佳固定化条件以应用于葡萄糖酸的生产和研究中。本文的实验结果主要有:1.对黑曲霉增殖培养的实验结果表明三十烷醇、赤霉素和α-萘乙酸这3种植物生长激素在低浓度下（0.1mg/L-1.0mg/L）对黑曲霉的生长均有促进作用,其中赤霉素的增殖作用最明显。2.将赤霉素加入到黑曲霉液体发酵培养基中,结果表明不同浓度的赤霉素对黑曲霉增殖都有影响。质量浓度为0.05、0.1、0.5、1.0、1.5mg/L的5个处理组64小时后菌浓度分别比对照组提高了25.12%、35.39%、32.16%、50.44%和31.38%。最佳质量浓度为1.0mg/L,此处理浓度下赤霉素对黑曲霉增殖的促进作用在接种后48h就明显表现出来。3.将赤霉素加入到黑曲霉液体发酵培养基中,对发酵法生产葡萄糖酸的各组发酵液进行还原糖测定,赤霉素对葡萄糖转化为葡萄糖酸有促进作用,得出最佳质量浓度为1.0mg/L。4.以海藻酸钠包埋法对黑曲霉进行固定化,采用加入不同材料的方法对固定化方法进行改进,得到采用质量浓度为3%的海藻酸钠和质量浓度为3%的CaCl2,同时固定化细胞的使用次数为4-5次,该条件下,采用分别加入二氧化硅和蒙脱土粉末的方法,蒙脱土固定化小球对葡萄糖的促进转化能力最强。以上结果表明将植物激素应用于黑曲霉的葡萄糖酸发酵中,能够达到促进黑曲霉发酵菌增殖的目的,既保证黑曲霉的快速生长优势,又可以促进葡萄糖酸的发酵。同时采用将不同材料加入固定化黑曲霉中固定化黑曲霉的方法来促进葡萄糖酸的生成,对实际生产有重要的指导意义。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 研究意义与内容
• 1.1 课题的提出及研究意义
• 1.2 研究内容与目的
• 1.2.1 研究内容
• 1.2.2 研究目的
• 1.3 论文的创新点
• 1.4 技术路线
• 2 文献综述
• 2.1 葡萄糖酸的现状
• 2.1.1 葡萄糖酸的应用
• 2.1.2 葡萄糖酸的制备方法
• 2.2 植物激素的生物学功能
• 2.3 固定化细胞技术
• 2.3.1 固定化细胞技术概要
• 2.3.2 固定化细胞的方法
• 2.4 还原糖测定方法
• 2.4.1 滴定分析法
• 2.4.2 层析技术
• 2.4.3 分光光度法
• 2.4.4 生物传感器
• 2.4.5 流动注射分析
• 3 黑曲霉增殖培养的研究
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.1.1 实验菌株
• 3.2.1.2 培养基
• 3.2.1.3 湿热灭菌
• 3.2.1.4 实验仪器
• 3.2.1.5 其它试剂
• 3.2.2 实验方法
• 3.2.2.1 黑曲霉的培养条件
• 3.2.2.2 黑曲霉测定方法的选择
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 黑曲霉的生长规律
• 3.3.2 温度对黑曲霉生长的影响
• 3.3.3 不同浓度的三十烷醇对黑曲霉生长的影响
• 3.3.4 不同浓度的Α－萘乙酸对黑曲霉生长的影响
• 3.3.5 不同浓度的赤霉素对黑曲霉生长的影响
• 3.4 本章小结
• 4 植物激素对黑曲霉发酵产葡萄糖酸的影响研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 菌种
• 4.1.2 主要试剂
• 4.1.3 培养条件
• 4.2 葡萄糖标准曲线的绘制
• 4.3 结果和讨论
• 4.3.1 还原糖标准曲线
• 4.3.2 不同浓度的三十烷醇对发酵液还原糖含量的影响
• 4.3.3 不同浓度的Α－萘乙酸对发酵液还原糖含量的影响
• 4.3.4 不同浓度的赤霉素对发酵液还原糖含量的影响
• 4.4 本章小结
• 5 海藻酸钠包埋法固定化黑曲霉的研究
• 5.1 前言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 黑曲霉
• 5.2.2 包埋小球的制作
• 5.3 结果与讨论
• 5.4 本章小结
• 6 固定化黑曲霉发酵法生产葡萄糖酸的影响研究
• 6.1 海藻酸钠固定化黑曲霉发酵产葡萄糖酸的研究
• 6.2 海藻酸钠和纳米材料固定化黑曲霉发酵产葡萄糖酸的研究
• 6.3 本章小结
• 7 结论与待解决的问题
• 7.1 结论
• 7.2 待解决的问题
• 参考文献
• 致谢