刺梨多糖分离纯化、理化性质及生物活性研究

论文摘要

本论文对刺梨汁中多糖成分进行分离纯化,并对其理化性质及生物活性进行研究,主要内容如下:1.刺梨多糖的分离纯化及理化性质研究刺梨汁经浓缩、乙醇沉淀、脱蛋白、脱色、DEAE-纤维素柱和Sepharose CL-6B柱层析,分离纯化出RRTP-1～RRTP-8共8个组分。其中RRTP-1和RRTP-3组分经凝胶柱层析法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定,证实为分子量分布均一组分。红外光谱显示其具有多糖特征吸收峰。凝胶渗透色谱法测定,RRTP-1和RRTP-3分子量分别为3200、52000。气相色谱分析RRTP-1由鼠李糖、阿拉伯糖、未知糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖等中性单糖组成,中性单糖摩尔比为1.00:16.75:13.37:5.86:11.49:22.73:7.80;RRTP-3由鼠李糖、阿拉伯糖、未知糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖等中性单糖组成,摩尔比为1.00:5.47:1.31:3.02:15.88:1.58。RRTP-1和RRTP-3糖醛酸含量分别为12.7%,16%。2.刺梨多糖的生物活性刺梨粗多糖RRTP及纯组分RRTP-1对羟基自由基体系、超氧阴离子自由基体系、二苯代苦味肼基自由基均有不同程度的清除作用,呈现一定的量效关系,且粗多糖对该三种自由基的清除效果均大于同浓度时的纯组分。中、高剂量刺梨粗多糖能使衰老小鼠血清、肝脏、脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力显著提高,丙二醛（MDA）含量均显著降低,并呈一定的量效关系,表明刺梨粗多糖能提高衰老小鼠体内抗氧化能力。加入RRTP-1的实验组神经干细胞损伤有所减轻,高浓度实验组细胞死亡率和乳酸脱氢酶漏出率较低。显示刺梨多糖RRTP-1对神经干细胞硫代硫酸钠损伤和谷氨酸损伤有保护作用。多数刺梨多糖组分能刺激PC12细胞产生神经纤维样突起,具有神经营养活性。但在本试验剂量范围内,刺梨多糖纯组分RRTP-1和RRTP-3与产生的活性细胞率未表现出量效关系。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略词表
• 第一章 文献综述
• 1.1 多糖的生物活性及其应用研究概况
• 1.1.1 多糖的生物活性
• 1.1.2 多糖的应用
• 1.1.3 展望
• 1.2 刺梨研究现状
• 1.3 本课题的研究意义及内容
• 第二章 刺梨多糖的分离纯化及理化性质研究
• 2.1 仪器、原料和主要试剂
• 2.1.1 仪器
• 2.1.2 原料和主要试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 刺梨粗多糖的制备
• 2.2.2 刺梨粗多糖脱蛋白
• 2.2.3 刺梨粗多糖的脱色
• 2.2.4 刺梨粗多糖的纯化
• 2.2.5 刺梨多糖各组分的纯度鉴定
• 2.2.6 多糖各纯组分红外光谱分析
• 2.2.7 刺梨多糖各纯组分相对分子量测定
• 2.2.8 刺梨多糖纯组分的单糖组成及摩尔比
• 2.2.9 糖醛酸含量测定
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 刺梨多糖分离纯化
• 2.3.2 纯度鉴定
• 2.3.3 多糖纯组分红外光谱分析
• 2.3.4 多糖纯组分相对分子量测定
• 2.3.5 多糖纯组分单糖组成分析
• 2.3.6 糖醛酸含量测定
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 第三章 刺梨多糖的生物活性研究
• 3.1 实验材料、试剂及仪器
• 3.1.1 实验动物
• 3.1.2 主要试剂
• 3.1.3 仪器
• 3.1.4 细胞株
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 刺梨多糖RRTP与RRTP-1体外抗氧化作用研究
• 3.2.2 刺梨多糖RRTP对衰老小鼠体内抗氧化能力的影响
• 3.2.3 刺梨多糖RRTP-1抗缺氧活性实验研究
• 3.2.4 刺梨多糖RRTP-1对神经干细胞谷氨酸损伤的保护作用
• 3.2.5 刺梨多糖神经营养活性实验研究
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 刺梨多糖RRTP与RRTP-1体外抗氧化作用
• 3.3.2 刺梨多糖RRTP对衰老小鼠体内抗氧化能力的影响
• 3.3.3 刺梨多糖RRTP-1抗缺氧活性实验研究
• 3.3.4 刺梨多糖RRTP-1对神经干细胞谷氨酸损伤的保护作用
• 3.3.5 刺梨多糖神经营养活性实验研究
• 3.4 讨论
• 3.4.1 刺梨多糖体外抗氧化作用
• 3.4.2 刺梨多糖对衰老小鼠体内抗氧化能力的影响
• 3.4.3 刺梨多糖抗缺氧活性
• 3.4.4 刺梨多糖对神经干细胞谷氨酸损伤的保护作用
• 3.4.5 刺梨多糖神经营养活性
• 3.5 小结
• 3.5.1 刺梨多糖体外抗氧化作用
• 3.5.2 刺梨多糖抗衰老作用
• 3.5.3 刺梨多糖抗缺氧活性
• 3.5.4 刺梨多糖对神经干细胞谷氨酸损伤的保护作用
• 3.5.5 刺梨多糖神经营养活性
• 致谢
• 参考文献
• 附录