蜂花粉固态发酵营养强化剂的研制

论文题目: 蜂花粉固态发酵营养强化剂的研制

论文类型: 硕士论文

论文专业: 微生物与生化药学

作者: 乔琳

导师: 戚薇

关键词: 蜂花粉,固态发酵,纳豆芽孢杆菌,嗜酸乳杆菌,免疫功能

文献来源: 天津科技大学

发表年度: 2005

论文摘要: 本论文采用纳豆芽孢杆菌和乳酸菌等益生菌对蜂花粉进行了固态发酵,确定了蜂花粉固态发酵最适菌株和最适发酵工艺,并对发酵后蜂花粉中几种主要营养成分和生理活性物质进行了分析测定,并通过动物功能性试验对发酵花粉的保健功能进行了评价。为开发出一种新型的集花粉和益生菌有益作用于一体的“纯天然、高营养”,并具有较好色、香、味的发酵型花粉制品,奠定了小试试验的基础。论文的研究内容和结果如下: 1.通过酵母菌、乳酸菌(保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌)、纳豆芽孢杆菌对花粉进行单菌、混菌固态发酵试验,最终确定了蜂花粉固态发酵的最适菌株是纳豆芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌,两菌按1∶1比例混合;最适发酵方式为浅层好氧发酵,接种方式为先接纳豆芽孢杆菌,发酵第3d再接入嗜酸乳杆菌;接种量为10%,花粉含水量为35～40%,发酵温度为30℃,发酵周期为8d。在此基础上采用20L固态发酵罐进行放大试验,其发酵工艺参数为:花粉装填量为罐体积的1/5,发酵温度30℃,每间隔2h连续搅拌0.5h,控制通气量以保持罐压在(0.03～0.05)Mpa。接入嗜酸乳杆菌后,通气改为每间隔12h,连续通气2h,花粉含水量为35～40%,接种量为10%,发酵周期为7d。发酵后的花粉气味鲜香,酸甜可口,花粉中纳豆芽孢杆菌的活菌数为4.5×10~7cfu/g,嗜酸乳杆菌的活菌数为2.7×10~7cfu/g。 2.分析测定了发酵花粉中主要营养成分和一些生理活性物质含量的变化情况,结果为:粗蛋白增加了5.9%,粗脂肪降低了1.57%,游离氨基酸增加了0.02%,总有机酸增加了0.79g/100g,pH值降到4.2,乳酸增加量最大达到0.20g/100g。发酵花粉中蛋白酶活力较发酵前有了提高并具有了纳豆激酶的活性。在发酵1d和4d,以上两种酶活分别达到最高值,为1023.5u/g和5.78IU/g。 3.分析了发酵前后花粉中短肽和小分子致敏蛋白的变化情况,发酵后花粉的短肽RP-HPLC洗脱峰比发酵前少了3个,推测发酵后花粉口味的改变可能与此有关,但需要进一步证实;通过SDS-PAGE发现,发酵后的花粉相对分子质量在(20～40)kD的可能为致敏蛋白的电泳带消失,说明发酵后花粉的致敏性可能被消除,但也需要进一步试验。

论文目录:

1 前言

1.1 花粉的概述

1.2 花粉的形态结构

1.3 花粉的营养成分及生物活性物质

1.4 蜂花粉药理作用的研究进展

1.5 蜂花粉发酵的研究进展

1.6 纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)的概述

1.7 本论文研究的目的和意义

1.8 本论文的研究内容

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 菌种

2.1.2 蜂花粉

2.1.3 实验动物

2.1.4 培养基

2.1.5 主要试剂

2.1.6 主要仪器设备

2.1.7 主要溶液的配制

2.2 实验方法

2.2.1 菌种的培养方法

2.2.2 花粉的消毒处理

2.2.3 花粉的发酵方法

2.2.4 花粉中活菌数的测定方法

2.2.5 pH值测定

2.2.6 还原糖含量的测定

2.2.7 总糖的测定方法

2.2.8 粗脂肪含量的测定

2.2.9 粗蛋白含量的测定

2.2.10 α-氨基氮含量的测定

2.2.11 非挥发性有机酸的测定

2.2.12 挥发性有机酸及乳酸的测定

2.2.13 短肽的测定方法

2.2.14 蛋白质的分析方法

2.2.15 蛋白酶活性测定方法

2.2.16 纳豆激酶酶活的测定方法

2.2.17 花粉功能性评价实验

3 结果与讨论

3.1 花粉固态发酵最适菌株的确定

3.1.1 单菌固态发酵

3.1.2 混菌固态发酵

3.2 花粉固态发酵条件的研究

3.2.1 发酵方式的确定

3.2.2 接种方式的确定

3.2.3 接种量的确定

3.2.4 花粉含水量的确定

3.2.5 发酵温度的确定

3.3 花粉发酵过程曲线

3.4 20L固态发酵罐放大实验

3.5花粉发酵过程中蛋白酶、纳豆激酶活力变化曲线

3.6发酵花粉营养成分的分析

3.7 发酵后花粉短肽种类的变化

3.8 花粉发酵前后致敏蛋白的初步检测

3.9发酵花粉增强免疫力的功能性评价实验

4结论

4.1结论

4.2本论文的创新之处:

4.3展望

5. 致谢

6. 参考文献

7. 攻读学位期间发表的论文

发布时间: 2007-01-10

参考文献

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