不同频率电刺激坐骨神经对DRG神经元GABA去极化反应的抑制作用

论文摘要

目的:本研究以背根神经节（Dorsal root ganglion,DRG）为模型,应用不同频率电刺激作用于大鼠坐骨神经远端,观察电刺激对GABA介导DRG神经元膜电位去极化反应的作用,探讨电刺激对DRG痛觉信息传导的影响。方法:在新鲜分离的大鼠DRG坐骨神经干标本上,应用细胞内微电极记录技术,通过Powerlab生物信号采集处理分析系统给予（刺激波宽0.025 ms,刺激强度2 V）电压刺激,刺激强度高于阈强度。引导出动作电位后,测定动作电位传导速度（Conduction velocity,CV）,由此判断细胞大小及被兴奋的神经纤维类别。在此基础上以波宽5 ms,强度2 V,频率分别为1 Hz、2 Hz、5 Hz、10 Hz和50 Hz的脉冲波作用于大鼠坐骨神经远端,观察刺激前后GABA（3×10-4 mol/L）介导的DRG神经元膜电位去极化反应幅值的变化。结果:1.神经纤维传导速度测定:实验中共40个细胞引导出动作电位,其中70%（28/40）属Aδ纤维,30%（12/40）属Aβ纤维。2.各频率刺激后不同时间段的反应幅值与刺激前比较:5个频率组均在刺激后2 min便可引起GABA介导的DRG神经元膜去极化反应的抑制。不同频率组抑制作用不同,最大抑制幅值出现的时间也不同。频率为1Hz、2Hz、5Hz、10Hz和50 Hz时,分别在刺激后2 min、2 min、24 min、12 min和2 min出现最大抑制,抑制率分别为16.78%±3.64%、19.80%±3.80%、24.68%±3.99%、29.20%±3.36%和20.44%±3.12%（n=45）;其抑制作用持续时间分别至刺激后24 min、24 min、48 min、﹥72 min和48 min,以10 Hz抑制作用持续时间最长。3.同一时间段不同刺激频率组间比较:刺激后同一时间段各频率组对GABA介导DRG神经元膜电位去极化反应的抑制幅值比较,发现刺激结束2 min、12 min、24 min、36 min、48 min、60 min和72 min后,5 Hz组和10 Hz组电刺激后对GABA介导DRG神经元膜去极化反应的抑制作用强于其他几个频率组,两组间比较10 Hz组抑制作用较强。结论:不同频率电刺激作用于大鼠坐骨神经,均可抑制DRG神经元膜GABA去极化反应,且10 Hz电刺激抑制作用最强。其机制可能是电刺激激活了伤害性感受Aδ纤维,使伤害性信息上传。也可能是电刺激使GABAA受体磷酸化,抑制GABA介导的“突触前抑制”,促进了兴奋性递质释放,从而易化伤害性信息的传入,导致疼痛。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 2.1 主要实验仪器
• 2.2 主要实验试剂
• 2.3 溶液配制
• 2.4 实验动物
• 2.5 微电极制备
• 2.6 DRG 标本的制备
• 2.7 实验装置
• 2.8 细胞内记录方法
• 2.9 统计学处理
• 结果
• 3.1 神经纤维传导速度测定
• 3.2 各频率刺激后不同时间段的反应幅值与刺激前比较
• 3.3 同一时间段不同频率组间比较
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 作者简介
• 导师评阅表