金雀异黄素抗肝癌细胞的实验研究

金雀异黄素抗肝癌细胞的实验研究

论文摘要

本项目针对金雀异黄素(Gen)对肝癌细胞的增殖抑制、诱导凋亡、抗侵袭作用及其作用机理,进行了肝癌细胞体外培养的实验研究。在细胞水平、分子水平进行了MTT法、流式细胞仪检测、电镜观察、免疫组织化学染色、Western blot检测。本研究通过MTT实验发现Gen对肝癌细胞有明显抑制作用,随着Gen浓度增加、时间延长细胞增殖速度减慢,呈剂量-效应关系。流式细胞仪检测Gen可使肝癌细胞阻滞在G2/M期,随时间延长G2/M期增加和S期减少明显。本研究通过透射电镜发现Gen对肝癌细胞超微结构的影响,Gen 20.0μg/ml作用24小时后可见凋亡典型改变。免疫组织化学染色研究发现随着Gen浓度的增加,抑制细胞凋亡的p53、Bcl-2蛋白表达下降,诱导细胞凋亡的Bax、Caspases-3蛋白呈现上升趋势。本研究证实了Gen可以抑制肝癌细胞生长,其作用机制可能为诱导肿瘤细胞凋亡。本研究通过基质金属蛋白酶的检测,证实Gen可抑制肝癌细胞的侵袭和转移。

论文目录

  • 英文缩略词
  • 前言
  • 第一章 文献回顾
  • 第一节 原发性肝癌的治疗现状
  • 1. 手术治疗
  • 2. 非手术治疗
  • 3. 生物治疗
  • 第二节 金雀异黄素抗癌作用的研究进展
  • 1. 分子结构和代谢
  • 2. 流行病学调查
  • 3. 抗肿瘤动物实验研究
  • 4. 体外实验研究
  • 5. 抗癌作用机制研究
  • 6. 毒副作用
  • 7. 结语
  • 参考文献
  • 第二章 实验研究
  • 实验一 Genistein 对人肝癌细胞株 SMMC-7721 体外生长抑制及凋亡机制的研究
  • 一、实验材料
  • 1. 细胞株
  • 2. 主要化学试剂及溶液配制
  • 3. 主要仪器设备
  • 二、实验方法
  • 1. 细胞培养与传代
  • 2. 倒置相差显微镜形态观察
  • 3. 透射电镜观察细胞超微结构
  • 4. MTT 试验检测细胞增殖
  • 5. 流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布和凋亡率
  • 6. 细胞免疫组织化学染色步骤
  • 三、统计学处理
  • 四、实验结果
  • 1. 倒置相差显微镜形态观察(图1-3)
  • 2. MTT 法检测 Gen 对细胞增殖的影响
  • 3. 透射电镜观察 Gen 对 SMMC-7721 细胞超微结构的影响
  • 4. 流式细胞仪检测 Gen 对 SMMC-7721 细胞周期的影响
  • 5. 免疫组化染色结果
  • 五、讨论
  • 实验二、金雀异黄素对人肝癌 SMCC-7721 细胞抗侵袭作用的研究
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 三、结果
  • 四、讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 攻读博士期间发表的学术论文及其他成果
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 致谢
  • 相关论文文献

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